31. 〖解析〗從表中可以看出，實(shí)驗(yàn)者是用第4支試管來作為對照的，在實(shí)驗(yàn)步驟中，要達(dá)到每支試管中溶液總量均為2.0ml,比較各組中的變量關(guān)系,就會發(fā)現(xiàn)1、2、3支試管中的區(qū)別應(yīng)該是酶的種類不同，第4支試管中不加酶，而加入等量的蒸餾水，其它因素均相同。故在1號試管中應(yīng)補(bǔ)充等量的緩沖液，2號試管中應(yīng)補(bǔ)充等量的微生物B的提取物，3號試管中也補(bǔ)充與其它試管等量的纖維素縣浮液，4號試管中應(yīng)補(bǔ)充的蒸餾水量=1.4+0.1=1.5ml。欲檢測四支試管的實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物的量，可用班氏試劑或斐林試劑，出現(xiàn)的現(xiàn)象是紅黃色或磚紅色，含糖量越多，顏色越深。上述結(jié)果中，若不考慮酶的最適PH和最適溫度的差異，在酶濃度也相同時(shí)，酶活性的差異就應(yīng)該是酶本身的差異了，如酶的氨基酸序列不同或空間結(jié)構(gòu)不同。上述三種微生物中，產(chǎn)物中含糖量最大的說明其酶的活性最強(qiáng)，即微生物B最有開發(fā)的價(jià)值。開發(fā)此酶可以解決農(nóng)產(chǎn)品秸稈轉(zhuǎn)化問題，可以為利用農(nóng)產(chǎn)品的廢棄物來生產(chǎn)飼料或酒精等開辟新機(jī)遇等。

〖答案〗【實(shí)驗(yàn)步驟】（2）如下表

（4）班氏  加熱（加熱至沸騰）

【分析討論】（1）4  （2）紅黃色  （3）不同酶的氨基酸序列不同（不同酶的空間結(jié)構(gòu)不同）  （4）微生物B  （5）葡萄糖可用作制取酒精的原料；用纖維素代替化石燃料（言之有理即給分）

31．（08?上海?41）利用纖維素解決能源問題的關(guān)鍵是高性能纖維素酶的獲取。請完善實(shí)驗(yàn)方案，并回答相關(guān)問題。

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹勘容^三種微生物所產(chǎn)生的纖維素酶的活性。

【實(shí)驗(yàn)原理】纖維素酶催化纖維素分解為葡萄糖，用葡萄糖的產(chǎn)生速率表示酶活性大��；用呈色反應(yīng)表示葡萄糖的生成量。

【實(shí)驗(yàn)材料】三種微生物（A～C）培養(yǎng)物的纖維素酶提取液，提取液中酶蛋白濃度相同。

【實(shí)驗(yàn)步驟】

（1）取四支試管，分別編號。

（2）在下表各列的一個(gè)適當(dāng)位置，填寫相應(yīng)試劑的體積量，并按表內(nèi)要求完成相關(guān)操作。

（3）將上述四支試管放入37℃的水浴，保溫1小時(shí)。

（4）在上述四支試管中分別加入        試劑，搖勻后，進(jìn)行              處理。

（5）觀察比較實(shí)驗(yàn)組的三支試管與對照組試管的顏色及其深淺。

【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】

微生物A提取物

微生物B提取物

微生物C提取物

顏色深淺程度

＋

＋＋＋

＋＋

【分析討論】

（1）該實(shí)驗(yàn)中的對照組是       號試管。

（2）實(shí)驗(yàn)組試管均呈現(xiàn)的顏色是             ，但深淺不同。

（3）上述結(jié)果表明：不同來源的纖維素酶，雖然酶蛋白濃度相同，但活性不同。若不考慮酶的最適pH和最適溫度的差異，其可能原因是                                     。

（4）你認(rèn)為上述三種微生物中，最具有應(yīng)用開發(fā)價(jià)值的是         。

（5）從解決能源問題的角度，開發(fā)這種纖維素酶的意義在于                         

                                                            。

30. 〖解析〗血球計(jì)數(shù)板直接記數(shù)的是細(xì)菌總數(shù)，不能排除死菌。

〖答案〗D

30．(08?廣東理基?39)取少量酵母菌液放入血球計(jì)數(shù)板直接記數(shù)，測得的數(shù)目是（  ）

A．活細(xì)胞數(shù)　　　　B．死細(xì)胞數(shù)       C．菌落數(shù)　　　　　D．細(xì)胞總數(shù)

29. 〖解析〗（1）②中的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源，②中不同濃度的碳源A影響細(xì)菌數(shù)量，稀釋涂布平板法來測定②中活菌數(shù)目。

（2）④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于④的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源，⑤培養(yǎng)基的中加入苯酚作為碳源。使用釋涂布平板法或平板劃線法可以在（6）上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。

（3）5支潔凈培養(yǎng)瓶→分別加入相同培養(yǎng)基（加等量的苯酚，用pH試紙檢測這5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基的pH值，用苯酚調(diào)試使之相等，苯酚是唯一的碳源）→分別接種5種等量的來自不同菌株的菌種→在相同的適宜條件下培養(yǎng)相同時(shí)間→再用pH試紙檢測這5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基的pH苯酚顯酸性，不同菌株的菌種降解苯酚的能力不同，5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基中的苯酚被分解的量不同，所以pH值不同。用pH試紙檢測這5支瓶內(nèi)培養(yǎng)基的pH值，從而比較不同菌株降解苯酚能力的大小。

（4）從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實(shí)驗(yàn)過程要無菌操作。

〖答案〗（1）苯酚  稀釋涂布平板法    

（2）④的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源     釋涂布平板法或平板劃線法      以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。

（3）用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一定時(shí)間后，測定培養(yǎng)液中苯酚含量

（4）培養(yǎng)基滅菌、接種環(huán)滅菌、接種過程無菌操作。

29．(08?廣東?38)苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品，請回答下列問題：

（1）②中培養(yǎng)口的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入        作為碳源，②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基          （A.影響；B.不影響）細(xì)菌的數(shù)量，如果要測定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用          法。

（2）④為對照、微生物在④中不生長、在⑤中生長，④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于         ；使用         法可以在⑥上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？

（3）如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小？

（4）實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其它微生物的污染？

28. 〖解析〗雜交實(shí)驗(yàn)中，不管是正交還是反交，后代性狀總是與母本性狀保持一致，可確定是細(xì)胞質(zhì)遺傳（該藥物是影響光合作用過程，故抗藥基因極可能是位于葉綠體）。

A和C既是一個(gè)選擇培養(yǎng)的過程，也是一個(gè)擴(kuò)大培養(yǎng)的過程。選擇的條件是氮源（莠去津或氮?dú)猓┖停ɑ颍┭鯕�；通過擴(kuò)大培養(yǎng)可提高選擇出來的所需細(xì)菌的密度。

固體培養(yǎng)基中的氮源只有莠去津及空氣中的氮?dú)�。有透明帶菌落說明該菌落的細(xì)菌分解了使培養(yǎng)基不透明的莠去津；無透明帶菌落的細(xì)菌并沒有分解莠去津，那么它們利用的氮源應(yīng)是氮?dú)�，是自生固氮菌�?/p>

〖答案〗（1）NADPH   葉綠體基質(zhì)   （2）細(xì)胞質(zhì)中

（3）①自然選擇

②初步選擇能降解莠去津的細(xì)菌（目的菌）并提高其密度        培養(yǎng)液中缺少甲類細(xì)菌可利用的氮源或（和）有氧條件抑制了甲類細(xì)菌的生長      對數(shù)

③氮?dú)?nbsp;  莠去津

28．(08?天津?31)莠去津是一種含氮的有機(jī)化合物，它是廣泛使用的除草劑之一。

（1）莠去津的作用機(jī)理之一是阻斷光反應(yīng)中的電子傳遞過程，影響NADP^＋形成　　　　　，進(jìn)而影響在　　　　　　　　　　　中進(jìn)行光合作用的暗反應(yīng)過程，最終抑制雜草生長。

（2）從使用莠去津農(nóng)田中，選到了能遺傳的耐莠去津雜草，將它與敏感莠去津植株雜交，結(jié)堅(jiān)果見下表：

雜交親本

后代中耐藥型植株比例（%）

后代中敏感型植株比例（%）

耐藥型♀×敏感型♂

100

0

敏感型♀×耐藥型♂

0

100

由表推斷，控制該耐藥性狀的基因位于　　　　　　　　。

（3）莠去津在土壤中不易降解，為修復(fù)被其污染的土壤，按下面程序選育能降解莠去津的細(xì)菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含過量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明。

據(jù)圖回答：

①由于莠去津的　　　　　作用，在長期使用莠去津的土壤中可能含有目的菌。

②下圖是A～C瓶中三類細(xì)菌的最大密度柱形圖，由圖推斷，從A瓶到C瓶液體培養(yǎng)的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　；甲類細(xì)菌密度迅速降低的主要原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　；從A瓶中應(yīng)選擇細(xì)菌生長處于　　　　　　期的菌液加入到B瓶中，培養(yǎng)效果會更好。

③在固體培養(yǎng)基中，無透明菌落利用的氮源主要是　　　　　　　　　　　　；有透明帶菌落利用的氮源主要是　　　　　　　　　　，據(jù)此可篩選出目的菌。

27. 〖解析〗藍(lán)藻（藍(lán)細(xì)菌）是原核生物，進(jìn)行光合作用，是自養(yǎng)需氧生物，在生態(tài)系統(tǒng)的成分中屬生產(chǎn)者，在營養(yǎng)結(jié)構(gòu)中是處于第一營養(yǎng)級。藍(lán)藻毒素是藍(lán)藻的次級代謝產(chǎn)物，可使藍(lán)藻在生存斗爭中處于較有利的地位。原癌基因在正常情況下是處于被抑制狀態(tài)，當(dāng)在致癌因子作用下原癌基因被激活，正常細(xì)胞分化成為癌細(xì)胞。對數(shù)期的菌體形態(tài)和生理特征穩(wěn)定，所以微生物培養(yǎng)中，通常選用對數(shù)期菌體作為菌種進(jìn)行培養(yǎng)。題干中已經(jīng)提示，“在每個(gè)培養(yǎng)皿中”“做三個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)”，所以只能在一個(gè)培養(yǎng)皿中選擇三個(gè)不同位置，且是重復(fù)實(shí)驗(yàn)，處理?xiàng)l件是完全相同的。實(shí)驗(yàn)組是滴加含溶藻細(xì)菌的培養(yǎng)液，那么對照組就滴加不含溶藻細(xì)

菌的培養(yǎng)液，其他條件均相同（如加的培養(yǎng)液的量、光照、培養(yǎng)的溫度等）。由于藍(lán)藻先培養(yǎng)，先形成菌落（綠斑），后加入溶藻細(xì)菌的培養(yǎng)液，溶藻細(xì)菌分解綠斑里的藍(lán)藻，最終會使藍(lán)藻的菌落（綠斑）褪色成為空斑（藍(lán)澡徹底被裂解死亡）。

〖答案〗⑴原核 第一營養(yǎng)級 自養(yǎng)需氧型

⑵不是 從抑制狀態(tài)變成激活狀態(tài)

⑶對數(shù)

⑷在每個(gè)培養(yǎng)皿中，選擇三個(gè)不同位置，各滴加等量菌液 在每個(gè)培養(yǎng)皿中，選擇三個(gè)不同位置，各滴加等量的、不含溶藻細(xì)菌的溶藻細(xì)菌培養(yǎng)液

⑸被溶藻細(xì)菌裂解（死亡）

27．(08?北京?31)水華可因藍(lán)藻爆發(fā)所致�？蒲腥藛T嘗試?yán)�用某種細(xì)菌限制藍(lán)藻數(shù)量，相關(guān)實(shí)驗(yàn)的示意圖如下。圖中①～⑥表示實(shí)驗(yàn)步驟。

請回答問題

（1）從細(xì)胞結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)與復(fù)雜程度上看，藍(lán)藻屬于　　　　　細(xì)胞；從生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)上看，藍(lán)藻屬于　　　　　細(xì)胞。藍(lán)藻的停放類型通常是　　　　　　　　　　　。

（2）引發(fā)水華的藍(lán)藻可產(chǎn)生藍(lán)藻毒素。藍(lán)藻毒素　　　　　　（是、不是）藍(lán)藻生長、繁殖所必需的物質(zhì)。藍(lán)藻毒素對人是一種致癌因子，可使原癌基因　　　　　　　，導(dǎo)致正常細(xì)胞發(fā)生癌變。

（3）圖中②、⑤通常使用的是①、④中已培養(yǎng)至　　　　　　　期的藍(lán)藻和溶藻細(xì)菌。

（4）圖中⑤實(shí)驗(yàn)組在每個(gè)培養(yǎng)皿中，如果做三個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，可采取的做法是：　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（5）藍(lán)藻通常呈藍(lán)綠色，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)褪色空斑，說明藍(lán)藻　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。