Question

13．金茶花是中國特有的觀賞品種，但易得枯萎病，降低觀賞價值．科學(xué)家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因，用轉(zhuǎn)基因方法培育出了抗枯萎病的新品種．請據(jù)圖回答：

（1）獲得②的方法有從基因文庫中獲取、PCR技術(shù)擴增和人工合成；①和②結(jié)合能形成③的過程叫基因表達載體的構(gòu)建，一般用相同的限制酶分別處理載體和含有目的基因的外源DNA分子，以便得到相同的粘性末端，能連接相同粘性末端的酶是DNA連接酶．構(gòu)建形成的③必須含有目的基因、啟動子、標(biāo)記基因和終止子．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，要將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA中，目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定的遺傳和表達的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，可通過DNA分子雜交技術(shù)的方法檢驗受體細(xì)胞基因中是否有目的基因．
（3）在⑤→⑥過程中，獲得抗病基因的金茶花細(xì)胞將經(jīng)歷脫分化和再分化過程后才能形成⑦，該過程需要生長素和細(xì)胞分裂素的誘導(dǎo)，通過轉(zhuǎn)基因方法獲得的抗體病金茶花，將來產(chǎn)生的配子中是否一定含有抗病基因？不一定．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是用轉(zhuǎn)基因方法培育出抗枯萎病新品種的過程，其中①表示質(zhì)粒；②表示目的基因；③表示基因表達載體；④表示轉(zhuǎn)基因金茶花植株．

解答 解：（1）獲取目的基因的方法包括從基因文庫中獲取、PCR技術(shù)體外擴增和人工合成；將②連接到①上并形成③過程叫基因表達載體的構(gòu)建，該過程需先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和質(zhì)粒，還需用DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒．基因表達載體的組成包括啟動子、目的基因、標(biāo)記基因和終止子．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其原理是：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上．根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上．目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定的遺傳和表達的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因；檢測受體細(xì)胞基因中是否有目的基因常用DNA分子雜交技術(shù)．
（3）將轉(zhuǎn)基因受體細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)包括脫分化和再分化兩個步驟，這兩個步驟都需要生長素和細(xì)胞分裂素的誘導(dǎo)．通過轉(zhuǎn)基因方法獲得的抗病金茶花可視為雜合子，其將來產(chǎn)生的配子中不一定含有抗病基因．
故答案為：
（1）從基因文庫中獲取   PCR技術(shù)體外擴增      基因表達載體的構(gòu)建    含有目的基因的外源DNA分子    DNA連接酶    啟動子    標(biāo)記基因
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法     T-DNA       轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因     DNA分子雜交技術(shù)
（3）脫分化     再分化     生長素和細(xì)胞分裂素      不一定

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因金茶花的培育過程圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的具體操作步驟；識記植物組織培養(yǎng)的原理及過程，能結(jié)合圖解準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．