Question

14．高致病性禽流感暴發(fā)的地區(qū)，家禽養(yǎng)殖業(yè)蒙受巨大的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)也威脅到人類的健康．科學(xué)家致力于提高家禽對病毒的抵抗力，減輕禽流感的傳播和流行．
（1）在雞的多個(gè)品種中都存在Mx蛋白，但只有少數(shù)品種的Mx蛋白具有抗病毒的活性．比較兩種Mx蛋白，發(fā)現(xiàn)其差異是第631號氨基酸的種類不同，這很可能是由于Mx基因發(fā)生了堿基對的替換而造成的．
（2）研究人員利用Mx基因做探針，從某個(gè)品種的雞體內(nèi)成功提取出正常Mx蛋白的mRNA，通過反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA，再利用某種病毒將cDNA攜帶進(jìn)入Mx基因缺陷的另一個(gè)品種的雞受精卵中，并將這些受精卵培育成成體．上述病毒起到了目的基因載體作用．
（3）檢測發(fā)現(xiàn)，在由（2）獲得的雞體內(nèi)cDNA成功表達(dá)了，從分子水平上說，這項(xiàng)檢測通常采用抗原-抗體雜交方法；但所合成的Mx蛋白是否具有正�；钚裕�還需要從個(gè)體水平上進(jìn)行病毒感染試驗(yàn)．
（4）讓轉(zhuǎn)基因雞的雌雄個(gè)體之間隨機(jī)交配，所產(chǎn)生的子一代、子二代均按照孟德爾的分離定律遺傳，這說明Mx基因已經(jīng)整合到轉(zhuǎn)基因雞的一條染色體上．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）由于兩種蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)上的差異只是第631號氨基酸的種類不同，這很可能是由于Mx基因發(fā)生了堿基對的替換而造成的．
（2）研究人員利用Mx基因做探針，從某個(gè)品種的雞體內(nèi)成功提取出正常Mx蛋白的mRNA，mRNA通過反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA．再利用某種病毒將cDNA攜帶進(jìn)入Mx基因缺陷的另一個(gè)品種的雞受精卵中，可知病毒起到了目的基因（運(yùn)）載體作用．
（3）檢測發(fā)現(xiàn)，在由（2）獲得的雞體內(nèi)cDNA成功表達(dá)了，從分子水平上說，這項(xiàng)檢測通常采用抗原-抗體雜交方法；但所合成的Mx蛋白是否具有正�；钚裕�還需要從個(gè)體水平上進(jìn)行（禽流感）病毒感染試驗(yàn)．
（4）基因分離的實(shí)質(zhì)是減數(shù)分裂形成配子時(shí)，控制一對相對性狀的等位基因隨著同源染色體的分開而分離，分別進(jìn)入子細(xì)胞中，而且這一定律只能適應(yīng)真核生物細(xì)胞核遺傳，因此讓轉(zhuǎn)基因雞的雌雄個(gè)體之間隨機(jī)交配，所產(chǎn)生的子一代、子二代均按照孟德爾的分離定律遺傳，這說明Mx 基因已經(jīng)整合到轉(zhuǎn)基因雞的一條染色體上．
故答案為：
（1）替換
（2）Mx基因    反轉(zhuǎn)錄     目的基因載體
（3）抗原-抗體雜交      病毒
（4）Mx基因已經(jīng)整合到轉(zhuǎn)基因雞的一條染色體上

點(diǎn)評 本題考查的是有關(guān)基因突變、基因分離定律、基因工程的原理和技術(shù)的相關(guān)知識．