Question

10．【加試題】生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的．請回答下列問題：
（1）培養(yǎng)大腸桿菌所用的LB培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌．檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣用無菌水進行一系列的梯度稀釋．
（2）將稀釋后的水樣分別用玻璃刮刀涂布到LB固體培養(yǎng)基，倒置于恒溫培養(yǎng)箱，在37℃條件進行培養(yǎng)．用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要（填需要或不需要）設置對照組．
（3）如圖表示培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列相關敘述正確的是C．

A．步驟①倒平板操作時，倒好后應立即將其倒過來放置
B．步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后迅速蘸取菌液后劃線
C．步驟③多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落
D．步驟④恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對大腸桿菌進行計數(shù)．

Answer 1

分析 1、稀釋涂布法：是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)．在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落．能夠測定樣品中活菌數(shù)的方法是：稀釋涂布平板法．
2、由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進行平板劃線，④是培養(yǎng)．

解答 解：（1）培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌．檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣用無菌水進行一系列的梯度稀釋．
（2）將稀釋后的水樣分別用玻璃刮刀涂布到LB固體培養(yǎng)基，為了防止冷凝水污染培養(yǎng)基，因此需要將培養(yǎng)基 倒置于恒溫培養(yǎng)箱，在37℃條件進行培養(yǎng)．用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要設置空白對照組．
（3）A、倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿，冷卻后將平板倒過來放置，A錯誤；
B、步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以沾取菌液后平板劃線，B錯誤；
C、步驟③多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落，C正確；
D、步驟④培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對大腸桿菌進行分離得到純種，平板劃線法不能對微生物進行計數(shù)，D錯誤．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌    無菌水
（2）涂布    倒置     37      需要         
（3）C

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生掌握無菌技術的主要內(nèi)容，掌握稀釋涂布平板法和平板劃線法的操作步驟以及應用區(qū)別，明確只有稀釋涂布平板法能夠?qū)ξ⑸�物進行計數(shù)．