紫杉醇是一種天然高效的抗癌藥物.請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì).
(1)據(jù)以下內(nèi)容擬定實(shí)驗(yàn)題目:
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(2)實(shí)驗(yàn)原理:?
①紫杉醇通過抑制紡錘絲的功能,從而抑制
,實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制.
②由于活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有
的功能特點(diǎn),能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)而不會(huì)被染色,而死亡細(xì)胞可被染色.借助臺(tái)盼藍(lán)染色可簡(jiǎn)便區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞.
實(shí)驗(yàn)材料:24孔細(xì)胞培養(yǎng)板(每孔培養(yǎng)體積不超過1ml),細(xì)胞培養(yǎng)液,犬乳腺腫瘤細(xì)胞(下面簡(jiǎn)稱細(xì)胞)懸液,用生理鹽水配置的濃度為4、8、16nmol/L的紫杉醇,臺(tái)盼藍(lán),血細(xì)胞計(jì)數(shù)板.
(3)實(shí)驗(yàn)步驟:
①24孔培養(yǎng)板分成四組,每6個(gè)平行孔為一組進(jìn)行編號(hào).往細(xì)胞培養(yǎng)液添加適量
等天然成分.各孔滴加0.8ml培養(yǎng)液,接種0.1ml細(xì)胞懸液.
②將培養(yǎng)板放在37℃、5%
(氣體)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h.
③
,對(duì)照組加入等量生理鹽水,放在培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng).
④分別在24h、48h、72h 時(shí)收集細(xì)胞進(jìn)行臺(tái)盼藍(lán)染色,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下觀察、記錄
,統(tǒng)計(jì)細(xì)胞存活率.
(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:據(jù)以上的實(shí)驗(yàn)步驟,設(shè)計(jì)表格記錄細(xì)胞存活率.
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