Question

紫杉醇是一種天然高效的抗癌藥物．請完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)．
（1）據(jù)以下內(nèi)容擬定實(shí)驗(yàn)題目：

 

．
（2）實(shí)驗(yàn)原理：?
①紫杉醇通過抑制紡錘絲的功能，從而抑制

 

，實(shí)現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞生長的抑制．
②由于活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有

 

的功能特點(diǎn)，能夠排斥臺盼藍(lán)而不會(huì)被染色，而死亡細(xì)胞可被染色．借助臺盼藍(lán)染色可簡便區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞．
實(shí)驗(yàn)材料：24孔細(xì)胞培養(yǎng)板（每孔培養(yǎng)體積不超過1ml），細(xì)胞培養(yǎng)液，犬乳腺腫瘤細(xì)胞（下面簡稱細(xì)胞）懸液，用生理鹽水配置的濃度為4、8、16nmol/L的紫杉醇，臺盼藍(lán)，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板．
（3）實(shí)驗(yàn)步驟：
①24孔培養(yǎng)板分成四組，每6個(gè)平行孔為一組進(jìn)行編號．往細(xì)胞培養(yǎng)液添加適量

 

等天然成分．各孔滴加0.8ml培養(yǎng)液，接種0.1ml細(xì)胞懸液．
②將培養(yǎng)板放在37℃、5%

 

（氣體）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h．
③

 

，對照組加入等量生理鹽水，放在培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)．
④分別在24h、48h、72h 時(shí)收集細(xì)胞進(jìn)行臺盼藍(lán)染色，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下觀察、記錄

 

，統(tǒng)計(jì)細(xì)胞存活率．
（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：據(jù)以上的實(shí)驗(yàn)步驟，設(shè)計(jì)表格記錄細(xì)胞存活率．

 

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Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程,植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞--制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的PH）．
3、探究實(shí)驗(yàn)的原則：對照原則和單一變量原則．

解答： 解：（1）據(jù)以下內(nèi)容可知，該實(shí)驗(yàn)的自變量時(shí)紫杉醇的濃度和作用時(shí)間，因變量時(shí)犬乳腺腫瘤細(xì)胞的存活率，因此可擬定實(shí)驗(yàn)題目：探究紫杉醇的濃度和作用時(shí)間對犬乳腺腫瘤細(xì)胞生長的作用（影響）．
（2）實(shí)驗(yàn)原理：?
①紫杉醇通過抑制紡錘絲的功能，從而抑制細(xì)胞有絲分裂，實(shí)現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞生長的抑制．
②細(xì)胞膜的功能特點(diǎn)是選擇透過性．
（3）①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，往往要在培養(yǎng)液中添加適量動(dòng)物血清等天然成分．
②動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需用適宜的氣體環(huán)境，因此需要將培養(yǎng)板放在37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h．
③根據(jù)所給實(shí)驗(yàn)材料可知，實(shí)驗(yàn)組分別加入0.1ml（等量且適宜）濃度為4、8、16mmol/L，對照組加入等量生理鹽水，放在培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)．
④分別在24h、48h、72h 時(shí)收集細(xì)胞進(jìn)行臺盼藍(lán)染色，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下觀察、記錄活細(xì)胞數(shù)和死亡細(xì)胞數(shù)，統(tǒng)計(jì)細(xì)胞存活率．
（4）據(jù)以上的實(shí)驗(yàn)步驟，可以設(shè)計(jì)以下表格記錄細(xì)胞存活率． ．
故答案為：
（1）探究紫杉醇的濃度和作用時(shí)間對犬乳腺腫瘤細(xì)胞生長的作用（影響）
（2）細(xì)胞有絲分裂（細(xì)胞增殖、細(xì)胞分裂）     選擇透過性
（3）①動(dòng)物血清（血清、動(dòng)物血漿、血漿）   ②CO₂
③實(shí)驗(yàn)組分別加入0.1ml（等量且適宜）濃度為4、8、16mmol/L
④活細(xì)胞數(shù)和死亡細(xì)胞數(shù)
（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果

點(diǎn)評：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)及其相關(guān)的探究實(shí)驗(yàn)，要求考生識記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程，掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及應(yīng)用，能根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康�，正確區(qū)分實(shí)驗(yàn)的自變量和因變量，根據(jù)探究實(shí)驗(yàn)的原則完善實(shí)驗(yàn)步驟，屬于考綱識記和理解層次的考查．