Question

3．家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力．將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥．下列說法不正確的是（　�。�

• A． 家蠶細(xì)胞培養(yǎng)所需二氧化碳的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH
• B． 來自cDNA文庫的干擾素基因片段構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)前端必須插入人的啟動(dòng)子
• C． 采用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因的實(shí)驗(yàn)中是以干擾素基因?yàn)槟０?/td>
• D． 進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用膠原蛋白酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞

Answer 1

分析 1、PCR技術(shù)的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
2、基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因等．
3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．

解答 解：A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需二氧化碳的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，A正確；
B、利用家蠶生成干擾素時(shí)，來自cDNA文庫的干擾素基因片段構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)前端必須插入家蠶的啟動(dòng)子，而不是人的啟動(dòng)子，B錯(cuò)誤；
C、采用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因的實(shí)驗(yàn)中是以干擾素基因?yàn)槟０�，C正確；
D、進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞，D正確．
故選：B．

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．