Question

通過動物細胞培養(yǎng)的方法可以研究某種化學物質是否能夠使染色體畸變，請你完成下列實驗并回答有關問題．
實驗原理：有毒物質能誘導染色體畸變，根據(jù)發(fā)生染色體畸變細胞的數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)），可判斷該化學物質的致畸性的強弱．
材料、藥品、用具：
活的小白鼠胚胎某種化學物質、某種酶液、動物細胞培養(yǎng)液、動物細胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、生理鹽水、滅菌設備、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、培養(yǎng)瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡．等等．
實驗步驟：
（1）制備細胞懸浮液
把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉入錐形瓶中，加入

 

酶液處理，使胚胎組織離散成單個細胞，再加入動物細胞培養(yǎng)液，制成細胞懸浮液．
（2）進行細胞培養(yǎng)
①取A、B二個潔凈的培養(yǎng)瓶，

 

．
②向A培養(yǎng)瓶中加入適量的該化學物質并將培養(yǎng)瓶搖勻；向B瓶中加入

 

．在動物細胞培養(yǎng)過程中，由于動物細胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長具有

 

現(xiàn)象，所以細胞停止分裂增殖時，培養(yǎng)瓶壁上形成的細胞層數(shù)是

 

．
（3）制作臨時裝片
①細胞增殖到大約第8代左右時，同時從恒溫箱中取出二個培養(yǎng)瓶，再次將瓶內動物細胞處理成細胞懸浮液，加入動物細胞固定液以便迅速殺死并固定細胞．
②靜置一段時間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央，

 

3～5min后，蓋上蓋玻片．
（4）鏡檢和統(tǒng)計
把臨時裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于

 

期的細胞，并與B組觀察結果作對比．
預期結果及相應的結論（與B組相比較）
如果

 

，則說明這種化學物質致畸性很強；
如果

 

，則說明這種化學物質致畸性較弱；
如果

 

，則說明這種化學物質沒有致畸性．

Answer 1

考點：動物細胞與組織培養(yǎng)過程

專題：

分析：實驗組：經過處理的組是實驗組．對照組：未經過處理的組是對照組．變量：實驗過程中可以變化的因素稱為變量．自變量：想研究且可人為改變的變量稱為自變量．因變量：隨著自變量的變化而變化的變量稱為因變量．無關變量：在實驗中，除了自變量外，實驗過程中存在一些可變因素，能對實驗結果造成影響，這些變量稱為無關變量．

解答： 解：（1）把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個細胞，再加入動物細胞培養(yǎng)液，制成細胞懸浮液．
（2）①取A、B二個潔凈的培養(yǎng)瓶，（消毒滅菌，）加入等量的細胞懸浮液．
②向A培養(yǎng)瓶中加入適量的該化學物質并將培養(yǎng)瓶搖勻；向B瓶中加入等量生理鹽水．在動物細胞培養(yǎng)過程中，由于動物細胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長具有接觸抑制現(xiàn)象，所以細胞停止分裂增殖時，培養(yǎng)瓶壁上形成的細胞層數(shù)是單層（或一層）．
（3）②靜置一段時間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央，用適宜濃度龍膽紫溶液染色3～5min后，蓋上蓋玻片．
（4）把臨時裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于細胞有絲分裂中期的細胞，并與B組觀察結果作對比．
預期結果及相應的結論：
如果染色體畸變的細胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)）很多，則說明這種化學物質致畸性很強；
如果染色體畸變的細胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)）較少，則說明這種化學物質致畸性較弱；
如果染色體畸變的細胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)）幾乎沒有，則說明這種化學物質沒有致畸性．
故答案為：
（1）胰蛋白
（2）①（消毒滅菌，）加入等量的細胞懸浮液
    ②等量生理鹽水 接觸抑制      單層（或一層）
（3）②用適宜濃度龍膽紫溶液染色
（4）細胞有絲分裂中
預期結果及相應的結論：
染色體畸變的細胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)）很多
染色體畸變的細胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)）較少
染色體畸變的細胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)）幾乎沒有

點評：本題考查探究實驗，意在考查提升學生理解動物細胞培養(yǎng)和分析實驗的能力．實驗設計時要注意單一變量原則和對照原則．要注意無關變量應該相同且適宜．