Question

15．下列關于利用農桿菌轉化法培育轉基因抗蟲植物的敘述，錯誤的是（　�。�

• A． 基因表達載體的構建是基因工程的核心，該過程中需要使用限制酶和DNA鏈接酶
• B． 農桿菌轉化法通常適用于傷口處細胞會分泌大量的酚類化合物的植物
• C． 將重組Ti質粒轉入農桿菌之前，常用Ca²⁺處理農桿菌使其成為感受態(tài)細胞
• D． 用DNA分子雜交法檢測目的基因已插入染色體DNA上，則說明轉基因植物生產成功

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、基因表達載體的構建是基因工程的核心，構建基因表達載體時，首先需要用同種限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA，A正確；
B、農桿菌能受植物傷口處的細胞分泌的大量酚類化合物吸引，并移向這些細胞，所以農桿菌轉化法通常適用于傷口處細胞會分泌大量的酚類化合物的植物，B正確；
C、將重組Ti質粒轉入農桿菌之前，常用Ca²⁺處理農桿菌使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進受體細胞吸收DNA分子，完成轉化過程，C正確；
D、用DNA分子雜交法檢測目的基因已插入染色體DNA上，則說明導入成功；植物表現出抗蟲特性，則說明轉基因植物生產成功，D錯誤．
故選：D．

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，了解基因工程技術的安全性問題，能結合所學的知識準確判斷各選項．