Question

土壤是“微生物的天然培養(yǎng)基”，下面是有關(guān)土壤中分解尿素的細(xì)菌分離和計數(shù)的實驗過程，請根據(jù)圖回答相關(guān)問題：

（1）能分解尿素的細(xì)菌代謝類型為 異氧需氧型 ，應(yīng)從富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層取土樣．

（2）為分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)該用 尿素為唯一氮源 的培養(yǎng)基進(jìn)行分離，并加入 酚紅 指示劑進(jìn)行鑒別．

（3）若取土樣5g，應(yīng)加入 45 ml的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液．因土壤中細(xì)菌密度很大，需要不斷加以稀釋，配制成如圖所示的不同濃度的土壤溶液．取樣稀釋前，一定要 搖均 以減少誤差．將103﹣107倍的稀釋液分別吸取0.1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用 涂布器（玻璃刮刀） 將菌液鋪平．這種接種方法稱為 稀釋涂布（平板）法 ．

（4）將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計具有 紅色環(huán)帶 （現(xiàn)象）的菌落數(shù)，結(jié)果如下表，其中 105或106 倍的稀釋比較合適．

稀釋倍數(shù) 103 104 105 106 107

菌落數(shù)（個） 500 367 248 36 18

 

Answer 1

（1）異氧需氧型

（2）尿素為唯一氮源 酚紅

（3）45

（4）搖均（震蕩、混勻） 涂布器（玻璃刮刀） 稀釋涂布（平板）法

（5）紅色環(huán)帶 105或106

【解析】

試題分析：閱讀題干和題圖可知，本題是考查土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)的知識，根據(jù)問題涉及的具體內(nèi)容梳理相關(guān)知識點，然后分析解答．

【解析】
（1）能分解尿素的細(xì)菌將尿素氧化成氨氣，代謝類型為異氧需氧型．

（2）尿素為唯一碳源的培養(yǎng)基上，只有能分解尿素的菌才能以尿素作為氮源生長繁殖，不能分解尿素的菌因缺乏氮源無法生長繁殖，因此分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)該用尿素為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行分離，分解尿素的菌在分解尿素時產(chǎn)生氨氣，使酚紅指示劑顯紅色，所以要加入酚紅指示劑進(jìn)行鑒別．

（3）若取土樣5g，應(yīng)加入45ml的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液，樣品的稀釋程度直接影響平板上生長的菌落的數(shù)目，選用一定稀釋范圍的樣品進(jìn)行培養(yǎng)，取樣稀釋前，一定要將菌液搖勻以減少誤差；將103﹣107倍的稀釋液分別吸取0.1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用稀釋涂布平板法將菌液用涂布器涂布到固體培養(yǎng)基上．

（4）將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計具有紅色環(huán)帶的菌落既是分解尿素的菌的菌落，估算樣品中的活菌數(shù)時，往往選取菌落數(shù)在30 到300之間的平板，分析表格是數(shù)據(jù)可知，105和106的稀釋度平板菌落數(shù)在這一范圍．