Question

6．科學(xué)家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．圖中①～⑦是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟，Ⅰ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)．請據(jù)圖作答：

（1）獲取“魚抗凍蛋白基因”有幾條途徑，其中一條途徑是以mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶（反轉(zhuǎn)錄酶）的催化下，合成互補的單鏈DNA，然后再合成雙鏈DNA；另一條途徑是從基因文庫中獲取，基因文庫又可分為基因組文庫和部分基因文庫（如：cDNA文庫）．
（2）轉(zhuǎn)基因過程中的核心步驟是①基因表達載體的構(gòu)建，在此過程中使用的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和DNA連接酶．魚的抗凍蛋白基因必需插入到Ti質(zhì)粒的T一DNA中才能整合到受體細胞的染色體DNA中，得到的結(jié)構(gòu)Ⅰ上除了目的基因、標記基因外，還必須有啟動子、終止子．
（3）步驟④～⑦應(yīng)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)的理論依據(jù)是植物細胞全能性．其中⑤和⑥步驟分別叫做
脫分化和再分化．

Answer 1

分析 分析圖解：圖中過程①表示基因表達載體的構(gòu)建，過程②表示目的基因?qū)�入農(nóng)桿菌，過程③表示利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細胞，過程④表示從葉片中獲得離體的葉肉細胞，過程⑤表示植物組織培養(yǎng)的脫分化過程，過程⑥表示再分化，過程⑦表示試管苗發(fā)育成轉(zhuǎn)基因植株．

解答 解：（1）目的基因的獲得可以采用反轉(zhuǎn)錄法，以mRNA為模板，通過逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成DNA基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫．
（2）基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，需要用限制酶對目的基因和質(zhì)粒進行切開后用DNA連接酶進行連接．Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移至受體細胞染色體的DNA上，因此目的基因要插入到T一DNA中．基因表達載體的組成除了目的基因、標記基因外，還必須有啟動子和終止子以轉(zhuǎn)錄目的基因．
（3）步驟④〜⑦應(yīng)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其理論依據(jù)是植物細胞全能性．其中④是脫分化形成愈傷組織，⑤為再分化形成幼苗．
故答案為：
（1）mRNA      逆轉(zhuǎn)錄酶（反轉(zhuǎn)錄酶）     基因組文庫
（2）基因表達載體的構(gòu)建        限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和DNA連接酶     T一DNA      啟動子、終止子
（3）植物組織培養(yǎng)     植物細胞全能性      脫分化     再分化

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程的含義，再結(jié)合圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．