Question

9．熒火蟲能發(fā)光是因?yàn)闊苫鹣x體內(nèi)可以通過(guò)熒光素酶催化的系列反應(yīng)所產(chǎn)生的現(xiàn)象．如果熒光素酶存在于植物體內(nèi)，也可使植物體發(fā)光．一直以來(lái)熒光素酶的惟一來(lái)源是從熒火蟲腹部提取的．但加利福利亞大學(xué)的一組科學(xué)家成功地通過(guò)轉(zhuǎn)基因工程實(shí)現(xiàn)了將熒光素酶基因?qū)�入到大腸桿菌體內(nèi)，并在大腸桿菌體內(nèi)產(chǎn)生熒光素酶．
請(qǐng)你根據(jù)已有的知識(shí)回答下列有關(guān)問(wèn)題：
（1）在此轉(zhuǎn)基因工程中，目的基因是熒光素酶基因．
（2）在該過(guò)程中需要多種酶的參與，其中包括限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶等．
（3）將此目的基因?qū)�入到大腸桿菌體內(nèi)需要運(yùn)載體的幫助．下列所列各項(xiàng)是選取運(yùn)載體的時(shí)不必考慮的是C．
A、能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存   B、具1至多個(gè)的限制酶切點(diǎn)
C、具有與目的基因相同的堿基片斷     D、具有某些標(biāo)記基因
（4）下列可作為受體細(xì)胞的生物有AD（多選）
A、土壤農(nóng)桿菌     B、結(jié)核桿菌       C、噬菌體         D、枯草桿菌
（5）在此轉(zhuǎn)基因工程中，是由質(zhì)粒承擔(dān)運(yùn)載體的．在將體外重組體DNA導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)之前通常要用CaCl2處理大腸桿菌，目的是以增大細(xì)胞壁的通透性，使重組基因能夠?qū)�入到受體細(xì)胞內(nèi)．
（6）與雜交育種、誘變育種相比，通過(guò)基因工程來(lái)培育新品種的主要優(yōu)勢(shì)是目的明確和培育周期、可以克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）在此轉(zhuǎn)基因工程中，實(shí)現(xiàn)了將熒光素酶基因?qū)�入到大腸桿菌體內(nèi)，并在大腸桿菌體內(nèi)產(chǎn)生熒光素酶，因此目的基因是熒光素酶基因．
（2）基因工程中運(yùn)用的工具酶包括限制酶和DNA連接酶．
（3）作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)； ②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)．故選：C．
（4）由于原核生物多為單細(xì)胞生物、繁殖快、遺傳物質(zhì)少等優(yōu)點(diǎn)，因此適合作為基因工程受體細(xì)胞．而結(jié)核桿菌具有強(qiáng)烈的病原性，不適宜作為受體細(xì)胞；噬菌體不作為受體細(xì)胞，一般作為運(yùn)載體．
（5）在此轉(zhuǎn)基因工程中，是由質(zhì)粒承擔(dān)運(yùn)載體的．在將體外重組體DNA導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)之前通常要用CaCl2處理大腸桿菌，目的是以增大細(xì)胞壁的通透性，使重組基因能夠?qū)�入到受體細(xì)胞內(nèi)．
（6）與雜交育種、誘變育種相比，通過(guò)基因工程來(lái)培育新品種的主要優(yōu)點(diǎn)有目的明確、培育周期短、可以克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性等．
故答案為：
（1）熒光素酶基因  
（2）限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶 
（3）C  
（4）AD  
（5）CaCl2  （或 Ca2+）  以增大細(xì)胞壁的通透性，使重組基因能夠?qū)�入到受體細(xì)胞內(nèi) 
（6）目的明確    培育周期短  可以克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具、操作步驟及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．