Question

11．干擾素是動(dòng)物或人體細(xì)胞受病毒感染后產(chǎn)生的一類糖蛋白，具有抗病毒、抑制腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性．回答下列問(wèn)題：
（1）干擾素的作用機(jī)理是：干擾素作用于宿主細(xì)胞膜上的相應(yīng)受體，激活該細(xì)胞核中基因表達(dá)產(chǎn)生多種抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通過(guò)激活RNA酶使病毒的RNA水解，有些則可與核糖體（細(xì)胞器）結(jié)合，通過(guò)抑制病毒多肽鏈的合成發(fā)揮抗病毒作用．干擾素還可以通過(guò)提高吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞的能力，抑制腫瘤細(xì)胞．
（2）干擾素的獲取方法是：從白細(xì)胞中獲取RNA，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄的過(guò)程獲得干擾素基因，利用DNA連接酶將干擾素基因與牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件連接在一起構(gòu)建基因表達(dá)載體，采用顯微注射的方法導(dǎo)入牛的受精卵細(xì)胞中，經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一段時(shí)間后，移植入母體內(nèi)發(fā)育成熟，即可獲得能產(chǎn)生干擾素的轉(zhuǎn)基因牛．
（3）干擾素基因?qū)�入受體細(xì)胞后，欲檢測(cè)其是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，采用的方法是分子雜交．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）RNA酶的作用是水解RNA；多肽的合成場(chǎng)所是核糖體，因此有些蛋白質(zhì)可與核糖體結(jié)合，通過(guò)抑制病毒多肽鏈的合成發(fā)揮抗病毒作用；在特異性免疫中，吞噬細(xì)胞將抗原處理后呈遞給T細(xì)胞．
（2）從白細(xì)胞中獲取RNA，通過(guò)反轉(zhuǎn)錄過(guò)程獲得干擾素基因．基因工程中構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需采用DNA連接酶將目的基因和載體連接形成重組質(zhì)粒．基因表達(dá)載體由啟動(dòng)子、標(biāo)記基因、目的基因和終止子組成，其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別與結(jié)合的部位．要將基因表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞體內(nèi)，采用的方法是顯微注射法，采用的受體細(xì)胞是動(dòng)物的受精卵，因?yàn)槭芫�卵的全能性最高�?br />（3）干擾素基因?qū)�入受體細(xì)胞后，欲檢測(cè)其是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，可采用分子雜交技術(shù)，即用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交．
故答案為：
（1）RNA酶  核糖體    T
（2）逆轉(zhuǎn)錄  DNA連接      顯微注射   受精卵
（3）分子雜交

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．