3、植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的關(guān)系
植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的原理都有細(xì)胞的全能性。在植物雜交過(guò)程中,融合的植物細(xì)胞必須經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)過(guò)程才能最終發(fā)育為雜種植株。也就是說(shuō),植物組織培養(yǎng)技術(shù)是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)。
2、植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng):
以煙草與大豆細(xì)胞融合為例。煙草與大豆的原生質(zhì)體融合后,將原生質(zhì)體轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上培養(yǎng),使原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁。這時(shí),在細(xì)胞混合物中,不僅有煙草-大豆細(xì)胞,還有煙草細(xì)胞、大豆細(xì)胞、煙草-煙草細(xì)胞、大豆-大豆細(xì)胞,因此需要對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行篩選。得到煙草-大豆細(xì)胞后,再通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù),培育雜種植株。
1、理解細(xì)胞全能性的概念,把握細(xì)胞全能性的特點(diǎn)。
細(xì)胞全能性是指生物體的細(xì)胞具有形成完整個(gè)體的潛能。受精卵、生殖細(xì)胞和已分化的體細(xì)胞均具有全能性。根本原因是細(xì)胞內(nèi)含有形成完整個(gè)體所需的全套基因。同一個(gè)體的每一個(gè)已分化的體細(xì)胞都由受精卵經(jīng)有絲分裂而來(lái),體細(xì)胞核內(nèi)基因與受精卵一樣,因此都具有全能性。分化的體細(xì)胞之所以沒(méi)有表達(dá)出全能性,是因?yàn)榛蜻x擇性表達(dá)。在離體和適當(dāng)?shù)臈l件下,分化的體細(xì)胞也能表達(dá)其全能性。
細(xì)胞全能性大小比較:植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞(動(dòng)物細(xì)胞只有細(xì)胞核具有全能性);受精卵>生殖細(xì)胞(配子、精子、卵細(xì)胞)>體細(xì)胞; 幼嫩的細(xì)胞>衰老的細(xì)胞。在體細(xì)胞中:分化程度低的>分化程度高的 ,細(xì)胞分裂能力強(qiáng)的>細(xì)胞分裂能力弱的。
9、植物體細(xì)胞雜交的意義:能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙,擴(kuò)大雜交親本范圍,培養(yǎng)新品種。
8、植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié):
(1)用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁,獲得有活力的原生質(zhì)體;
(2)原生質(zhì)體間的融合:
方法:物理法(離心、振動(dòng)、電激)
化學(xué)法(聚乙二醇PEG)
7、植物體細(xì)胞雜交的原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性
外植體愈傷組織根、芽植物體。
6、植物組織培養(yǎng)過(guò)程:
5、細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件:
(1)離體(必要條件);
(2)一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):(水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、氨基酸等)、激素(細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素);
(3)適宜的條件:(無(wú)菌、適宜的溫度、pH)。
4、細(xì)胞分化的本質(zhì):基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。
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