Question

3．已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷．人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖．將這兩種細胞在培養(yǎng)皿中混合，加促融劑促進細胞融合，獲得雜種細胞，并生產單克隆抗體．請回答：
（1）細胞融合后，試管中細胞的種類是5種．
（2）生產單克隆抗體時，一般不直接利用一個B淋巴細胞，主要原因是B淋巴細胞不能無限增殖．
（3）①過程中，常用的誘導因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等．
（4）②過程為細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體，其中通入CO₂的目的主要是維持培養(yǎng)液的pH．
（5）④表示雜交瘤細胞的擴大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內培養(yǎng)．體內培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點是無需再提供營養(yǎng)物質以及無菌環(huán)境，操作簡便．
（6）為了從培養(yǎng)液中分離出雜種細胞，需在③過程向培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，理由是雜交瘤細胞可利用淋巴細胞中的S途徑合成DNA，從而才能在該培養(yǎng)液中增殖．

Answer 1

分析 1、分析題圖：①是誘導細胞融合，②利用特定選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)并篩選，獲得雜交瘤細胞，③用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產生特定抗體的雜交瘤細胞，④是培養(yǎng)篩選出的雜交瘤細胞
2、單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞（A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞），不需要A、B、AA、BB型細胞．第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產生特定抗體的雜交瘤細胞．

解答 解：（1）細胞融合后，試管中細胞的種類是5種，A、B、AA、BB、AB型細胞．
（2）B淋巴細胞不能無限增殖，故生產單克隆抗體時，一般不直接利用一個B淋巴細胞．
（3）①誘導細胞融合，常用的誘導方法有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等．
（4）②過程為細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體，其中通入CO₂的目的主要是維持培養(yǎng)液的pH．
（5）④表示雜交瘤細胞的擴大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內培養(yǎng)．體內培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點是無需再提供營養(yǎng)物質以及無菌環(huán)境，操作簡便．
（6）在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，培養(yǎng)后收集增殖細胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D全合成途徑的骨髓細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖，淋巴細胞一般不分裂增殖．因此培養(yǎng)液中加入該物質后，不能生長的細胞有骨髓瘤細胞、融合的淋巴細胞、融合的骨髓瘤細胞、淋巴細胞．人淋巴細胞和骨髓癌細胞融合后的雜種細胞中可以利用淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖．
故答案為：
（1）5
（2）B淋巴細胞不能無限增殖
（3）聚乙二醇、滅活的病毒、電激
（4）細胞   維持培養(yǎng)液的pH
（5）腹腔  無需再提供營養(yǎng)物質以及無菌環(huán)境，操作簡便
（6）氨基嘌呤    淋巴細胞中的S

點評 題考查單克隆抗體的制備過程，意在考查考生分析題文中提取有效信息和得出正確結論的能力；識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系的能力；能運用所學知識，解決生物學問題的能力