Question

【題目】將刺槐的耐鹽堿基因轉(zhuǎn)移到主要的農(nóng)作物水稻體內(nèi)，可以增大水稻的種植面積，科學(xué)利用鹽堿地。

（1）刺槐基因組文庫含有該生物種群的 基因；用刺槐發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA 產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA（ cDNA）片段，與載體連接后儲(chǔ)存于一個(gè)受體菌群，建立cDNA文庫。與基因組文庫相比cDNA文庫的基因中無 和 。

（2）培育耐鹽堿的轉(zhuǎn)基因水稻可以從刺槐的基因組文庫中____ 出耐鹽堿基因插入到 上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使耐鹽堿基因進(jìn)入水稻細(xì)胞并將其插入水稻細(xì)胞中的染色體上。

（3）將轉(zhuǎn)基因水稻細(xì)胞通過 技術(shù)得到轉(zhuǎn)基因植株，要確認(rèn)該耐鹽堿基因是否在水稻植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)此水稻植株中該基因的 ，如果檢測(cè)結(jié)果呈陽性，再在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的 是否得到提高。

（4）讓二倍體轉(zhuǎn)基因耐鹽堿水稻自交，子代中耐鹽堿與不耐鹽堿植株的數(shù)量比為3：1，推測(cè)該耐鹽堿基因整合到了 （同源染色體的一條上、同源染色體的兩條上）。

Answer 1

【答案】

（1）全部（1分） 逆轉(zhuǎn)錄（或“反轉(zhuǎn)錄”）（1分） 啟動(dòng)子（或“非編碼區(qū)”，或“具有啟動(dòng)

作用的DNA片段”等。合理給分）（此答案可與后一個(gè)答案順序調(diào)整）（1分） 內(nèi)含

子、（或“非編碼序列”）（此答案可與前一個(gè)答案順序調(diào)整）（1分）

（2）篩選（2分） （Ti質(zhì)粒的）T-DNA（或“可轉(zhuǎn)移DNA”）（2分）

（3）植物組織培養(yǎng)（2分） 表達(dá)產(chǎn)物（2分） 耐鹽堿性（2分）

（4）同源染色體的一條上（1分）

【解析】

（1）基因組文庫含有該生物種群的全部基因，cDNA含的是部分基因，故是全部。mRNA得到DNA需要經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄�；�因組文庫中有基因全部序列，包括非編碼序列如啟動(dòng)子，還有內(nèi)含子。

（2）培育耐鹽堿的轉(zhuǎn)基因水稻可以從刺槐的基因組文庫中篩選出耐鹽基因，然后通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上可以將該耐鹽基因整合到染色體的DNA上。

（3）轉(zhuǎn)基因水稻需要通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)得到轉(zhuǎn)基因植株。要確認(rèn)該耐鹽堿基因是否在水稻植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)此水稻植株中該基因是否表達(dá)，可以用抗原-抗體雜交，如果呈陽性可以再進(jìn)一步在個(gè)體水平上檢測(cè)其耐鹽堿性。

（4）讓二倍體轉(zhuǎn)基因耐鹽堿水稻自交，子代中耐鹽堿與不耐鹽堿植株的數(shù)量比為3：1，說明遵循基因的分離定律，推測(cè)該耐鹽堿基因整合到了同源染色體的一條染色體上。

生物種類	植物	動(dòng)物	微生物
常用方法	農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法	顯微注射技術(shù)	感受態(tài)細(xì)胞法
受體細(xì)胞	體細(xì)胞或受精卵	受精卵	原核細(xì)胞
轉(zhuǎn)化過程	將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的TDNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上→表達(dá)	將含有目的基因的表達(dá)載體提純→取卵（受精卵）→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動(dòng)物	Ca2＋處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→重組表達(dá)載體DNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子