Question

【題目】土壤中含有大量的難溶性磷酸鹽，為了從土壤中篩選出能夠?qū)㈦y溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)化為植物能吸收的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株，以便將其添加到有機肥中，改善植物磷元素供應，科研人員進行如下實驗：

實驗原理：固體培養(yǎng)基中難溶性磷酸鹽在微生物的作用下溶解，會在菌落周圍形成透明圈（如圖1），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

實驗步驟:

步驟1 取某地區(qū)土樣5g制得土壤溶液后稀釋，取稀釋液lmL接種到基礎培養(yǎng)基A上，在適宜溫度下培養(yǎng)72h。

步驟2 在基礎培養(yǎng)基A上用接種環(huán)挑取代表性菌落再次接種，培養(yǎng)34d后觀察菌落特征和透明圈的大小，初步篩選出三種優(yōu)良解磷菌株（如表）。

菌株	透明圈直徑（D）	菌落直徑（d）	D/d
M-3-01	18.8	12.3	1.5
B3-5-6	20.7	8.0	2.6
T1-4-01	9. 1	6.5	1.4

請據(jù)以上資料，回答下列問題：

（1）從物理形態(tài)上看，培養(yǎng)基A屬于_________培養(yǎng)基，為了篩選出優(yōu)良解磷菌株，培養(yǎng)基中加入的磷源是_________。

（2）步驟1中的接種方法是_________，應該在_________旁完成操作。步驟2中對接種環(huán)采用的滅菌方法是_________滅菌。

（3）根據(jù)表中的實驗結(jié)果可以確定溶解磷能力最強的菌株是_________。

（4）為進一步測定初步篩選的三種菌株實際溶解磷的能力，研究人員將它們接種到基礎培養(yǎng)基B中，并在37℃、200r·min-l搖床培養(yǎng)，定期取上清液，測定溶液中可溶性磷含量，得到如圖2所示曲線。

①用搖床進行振蕩培養(yǎng)的好處之一是增加培養(yǎng)液中的_________。

②圖2所示曲線結(jié)果表明最優(yōu)良的解磷菌株是_________。

Answer 1

【答案】固體難溶性磷酸鹽稀釋涂布平板法酒精燈火焰灼燒B3﹣5﹣6溶氧量（氧氣含量）M﹣3﹣01

【解析】

土壤是微生物的天然培養(yǎng)基。從土壤中篩選出能夠?qū)㈦y溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)化為植物能吸收的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株必須使用以難溶性磷酸鹽作為唯一磷源的選擇培養(yǎng)基。表格中的透明圈越大，菌落直徑越小，說明降解難溶性磷酸鹽的能量越強。據(jù)此分析作答。

（1）菌落必需在固體培養(yǎng)基上才能形成（培養(yǎng)過程中菌體不能運動）；要篩選溶解難溶性磷能力強的菌株，必須以難溶性磷酸鹽作為唯一磷源。

（2）步驟1的目的是從土壤微生物中篩選解磷微生物，由于土壤樣液中微生物種類和數(shù)量多，因此，最好采用稀釋涂布平板法進行接種，為了避免雜菌污染，應該在酒精燈火焰旁完成操作，接種環(huán)滅菌方法是灼燒滅菌。

（3）根據(jù)實驗原理中“透明圈直徑與菌落直徑比代表微生物溶解磷的能力大小”，結(jié)合表格數(shù)據(jù)可以確定解磷能力最強的菌株是B3-5-6。

（4）①搖床培養(yǎng)是實驗室培養(yǎng)需氧微生物的常用方法，使用搖床培養(yǎng)，不僅可以增大培養(yǎng)液中溶氧量，促進微生物的有機呼吸，而且能夠增加菌體與培養(yǎng)液的接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

②根據(jù)實驗曲線圖，不難看出M-3-01實際溶解磷能力最強。