用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過(guò)程如下：

第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱(chēng)“靶基因”。

第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neoR基因

   （新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。

第三步：將插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過(guò)同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。

第四步：將第三步處理后的胚胎于細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。


其基本原理如下圖所示：

（1）第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neoR基因不僅能使靶基因失活，還是          ；“靶基因失活”的含義是            。

（2）從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有                       、                       、                       等。

（3）科學(xué)家可以通過(guò)‘“基因敲除”技術(shù)來(lái)治療疾病，上題中獲得的基因敲除小鼠，能否直接用來(lái)研究基因功能并說(shuō)明原因                       ，                             

                        。                                                                                                

（1）限制酶、DNA連接酶  標(biāo)記基因  靶基因不能正常表達(dá)

（2）克隆技術(shù)  轉(zhuǎn)基因技術(shù)  細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（合理給分）

（3）不能，因?yàn)樵撔∈篌w內(nèi)仍有一個(gè)正常的靶基因，也能表達(dá)性狀。故不能得到靶基因的功能（2分）

練習(xí)冊(cè)系列答案
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科目：高中生物 來(lái)源：2011-2012學(xué)年安徽省宣城中學(xué)高二下學(xué)期5月月考生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

回答有關(guān)生物工程的問(wèn)題。（8分）
小鼠是實(shí)驗(yàn)室常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如：利用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體、利用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中導(dǎo)致了“基因敲除”技術(shù)的出現(xiàn)。
用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體。
（1）．將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射適量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙組注射________________（作對(duì)照）。
（2）．為了保存有價(jià)值的雜交瘤細(xì)胞系，通常用超低溫將其凍存，請(qǐng)分析其原因____________
___________________。
用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過(guò)程如下：
第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱(chēng)“靶基因”。
第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neoR基因（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。
第三步：將插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過(guò)同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步：將第三步處理后的胚胎干細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。
其基本原理如下圖所示：

（3）．第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是                     。neoR基因不僅能使靶基因失活，還可作為       ；“靶基因失活”的根本原因是            。
（4）．從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有           、             等。

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科目：高中生物 來(lái)源：2011-2012學(xué)年廣東省新興縣惠能中學(xué)高一下學(xué)期第一次月考生物試卷 題型：綜合題

（現(xiàn)代生物科技）（8分）用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過(guò)程如下：
第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱(chēng)“靶基因”。
第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neoR基因
（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。
第三步：將插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過(guò)同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步：將第三步處理后的胚胎于細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。
其基本原理如下圖所示：

（1）第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是                     。neoR基因不僅能使靶基因失活，還是         ；“靶基因失活”的含義是           
（2）從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有         、        、         等。
（3）科學(xué)家可以通過(guò)‘“基因敲除”技術(shù)來(lái)治療疾病，上題中獲得的基因敲除小鼠，能否直接用來(lái)研究基因功能并說(shuō)明原因                      ，                   
                       。     

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科目：高中生物 來(lái)源：2012屆山東省實(shí)驗(yàn)中學(xué)高三第四次診斷考試?yán)砜凭C合試卷（生物部分） 題型：綜合題

（現(xiàn)代生物科技）（8分）用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過(guò)程如下：
第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱(chēng)“靶基因”。
第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neoR基因
（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。
第三步：將插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過(guò)同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步：將第三步處理后的胚胎于細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。
其基本原理如下圖所示：

（1）第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是                     。neoR基因不僅能使靶基因失活，還是         ；“靶基因失活”的含義是           
（2）從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有         、        、         等。
（3）科學(xué)家可以通過(guò)‘“基因敲除”技術(shù)來(lái)治療疾病，上題中獲得的基因敲除小鼠，能否直接用來(lái)研究基因功能并說(shuō)明原因                      ，                   
                       。     

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科目：高中生物 來(lái)源：2013屆安徽省高二下學(xué)期5月月考生物試卷（解析版） 題型：綜合題

回答有關(guān)生物工程的問(wèn)題。（8分）

小鼠是實(shí)驗(yàn)室常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如：利用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體、利用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中導(dǎo)致了“基因敲除”技術(shù)的出現(xiàn)。

用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體。

（1）．將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射適量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙組注射________________（作對(duì)照）。

（2）．為了保存有價(jià)值的雜交瘤細(xì)胞系，通常用超低溫將其凍存，請(qǐng)分析其原因____________

___________________。

    用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過(guò)程如下：

第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱(chēng)“靶基因”。

第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neoR基因（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。

第三步：將插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過(guò)同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。

第四步：將第三步處理后的胚胎干細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。

其基本原理如下圖所示：

（3）．第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neoR基因不僅能使靶基因失活，還可作為        ；“靶基因失活”的根本原因是             。

（4）．從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有            、              等。

 

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科目：高中生物 來(lái)源：2011-2012學(xué)年山東省高三第四次診斷考試?yán)砜凭C合試卷（生物部分） 題型：綜合題

（現(xiàn)代生物科技）（8分）用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過(guò)程如下：

第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱(chēng)“靶基因”。

第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neoR基因

   （新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。

第三步：將插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過(guò)同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。

第四步：將第三步處理后的胚胎于細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。

其基本原理如下圖所示：

（1）第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neoR基因不僅能使靶基因失活，還是          ；“靶基因失活”的含義是           

（2）從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有          、         、          等。

（3）科學(xué)家可以通過(guò)‘“基因敲除”技術(shù)來(lái)治療疾病，上題中獲得的基因敲除小鼠，能否直接用來(lái)研究基因功能并說(shuō)明原因                       ，                   

                        。     

 

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