Question

（現(xiàn)代生物科技）（8分）用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過(guò)程如下：
第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱“靶基因”。
第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neo^R基因
（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。
第三步：將插入neo^R基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過(guò)同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步：將第三步處理后的胚胎于細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。
其基本原理如下圖所示：

（1）第二步中neo^R基因插入靶基因使用的工具酶是                     。neo^R基因不僅能使靶基因失活，還是         ；“靶基因失活”的含義是           
（2）從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有         、        、         等。
（3）科學(xué)家可以通過(guò)‘“基因敲除”技術(shù)來(lái)治療疾病，上題中獲得的基因敲除小鼠，能否直接用來(lái)研究基因功能并說(shuō)明原因                      ，                   
                       。     

Answer 1

（1）限制酶、DNA連接酶 標(biāo)記基因 靶基因不能正常表達(dá)
（2）克隆技術(shù) 轉(zhuǎn)基因技術(shù) 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（合理給分）
（3）不能，因?yàn)樵撔∈篌w內(nèi)仍有一個(gè)正常的靶基因，也能表達(dá)性狀。故不能得到靶基因的功能（2分）

解析