Question

回答有關(guān)生物工程的問題。（8分）

小鼠是實(shí)驗(yàn)室常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如：利用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體、利用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中導(dǎo)致了“基因敲除”技術(shù)的出現(xiàn)。

用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體。

（1）．將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射適量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙組注射________________（作對(duì)照）。

（2）．為了保存有價(jià)值的雜交瘤細(xì)胞系，通常用超低溫將其凍存，請(qǐng)分析其原因____________

___________________。

    用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過程如下：

第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱“靶基因”。

第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neo^R基因（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。

第三步：將插入neo^R基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。

第四步：將第三步處理后的胚胎干細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。

其基本原理如下圖所示：

（3）．第二步中neo^R基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neo^R基因不僅能使靶基因失活，還可作為        ；“靶基因失活”的根本原因是             。

（4）．從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有            、              等。

 

Answer 1

【答案】

（8分，每空1分）（1）．獲得能產(chǎn)生抗X病毒抗體的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）    等量不含X病毒的溶液(2)．超低溫抑制酶活性，利于保存其特性(3)．限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）、DNA連接酶    標(biāo)記基因    靶基因中的脫氧核苷酸數(shù)量序列發(fā)生改變，不能正常表達(dá)

(4)．克隆技術(shù)  轉(zhuǎn)基因技術(shù)（合理給分）

【解析】制備單克隆抗體，需對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選，注入抗原，看是否發(fā)生凝集反應(yīng)，通常實(shí)驗(yàn)要做對(duì)照實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)組注入一定量的抗原，對(duì)照組注入等量不含抗原的溶液，低溫保存是利用酶在低溫條件下活性被抑制而不變性利于保存其特性。把目的基因插入運(yùn)載體中通常用限制酶和DNA連接酶，通常一些特殊抗性的基因作為標(biāo)記基因?qū)�入受體細(xì)胞內(nèi)沒有表達(dá)掘所需的產(chǎn)品原因通常是靶基因發(fā)生基因突變即其中的脫氧核苷酸數(shù)量序列發(fā)生改變，不能正常表達(dá)，基因敲除的胚胎干細(xì)胞利用的技術(shù)有轉(zhuǎn)基因技術(shù)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，克隆技術(shù)，動(dòng)物胚胎移植技術(shù)等。