Question

9．如圖為DNA粗提取過程中的一些重要操作，請據圖回答下列問題．
（1）正確的操作順序是C→B→E→D→A．
（2）C、E步驟都加入蒸餾水，但其目的不同，分別是加速血細胞的破裂和降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出．
（3）A步驟中所用酒精必須經過充分預冷才能使用，該步驟的目的是提取含雜質較少（或較純凈）的DNA．

Answer 1

分析 DNA的粗提取與鑒定的實驗原理是：
①DNA的溶解性，DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點可以選擇適當濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達到分離的目的；
②DNA不容易酒精溶液，細胞中的某些蛋白質可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質和DNA進一步分離；
③DNA對于酶、高溫和洗滌劑的耐受性，蛋白酶能水解蛋白質，但是不能水解DNA，蛋白質不能耐受較高溫度，DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細胞膜，但是對DNA沒有影響；
④在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍色．

解答 解：（1）DNA的粗提取和鑒定步驟是：加入蒸餾水，破碎細胞→過濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質→DNA的析出→鑒定．所以正確的操作順序是C→B→E→D→A．
（2）C加蒸餾水是使血細胞吸水破裂，E加蒸餾水是使NaCl溶液的濃度降低，析出DNA．
（3）DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以A步驟中所用酒精必須是經過充分預冷的才能使用，以便除去溶于酒精的雜質，提取含雜質較少（或較純凈）的DNA．
故答案為：
（1）C→B→E→D→A
（2）加速血細胞的破裂　   降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出
（3）充分預冷　   提取含雜質較少（或較純凈）的DNA

點評 本題考查了DNA的粗提取與鑒定的相關知識，包括實驗的原理、操作步驟等，意在考查考生的識記能力和實驗操作能力，難度適中．考生要識記材料選擇的原則、實驗原理，注意DNA雖能溶于氯化鈉溶液，但是在O.14mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低．對于DNA粗提取和鑒定實驗的實驗原理和具體操作步驟的掌握是本題解題的關鍵．