Question

8．某科研小組利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將豌豆的A（抗蟲(chóng)基因）導(dǎo)入玉米體細(xì)胞．以獲得具有抗蟲(chóng)性狀的新品種．請(qǐng)回答下列問(wèn)題．
（1）若要從豌豆中獲得抗蟲(chóng)基因，可首先建立豌豆的基因組文庫(kù)，再?gòu)闹泻Y選出所需的抗蟲(chóng)基因．理論上，基因組文庫(kù)含有生物的全部基因，cDNA文庫(kù)中含有生物的部分基因．
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增抗蟲(chóng)基因時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物有DNA模板、2種引物、4種脫氧核苷酸和耐熱的DNA聚合酶，擴(kuò)增過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成．
（3）導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因的玉米細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成完整植株，該技術(shù)包括脫分化和再分化兩個(gè)階段．
（4）若要檢查雜交細(xì)胞中是否具有A基因，在分子水平上，常采用DNA分子雜交技術(shù)，該技術(shù)用到DNA分子探針，常用同位素（同位素標(biāo)記）或熒光標(biāo)記．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、植物組織培養(yǎng)的過(guò)程：外植體$\stackrel{脫分化}{→}$愈傷組織$\stackrel{再分化}{→}$胚狀體→新植體．

解答 解：（1）若要從豌豆中獲得抗蟲(chóng)基因，可首先建立豌豆的基因組文庫(kù)，再?gòu)闹泻Y選出所需的抗蟲(chóng)基因．基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)，其中基因組文庫(kù)含有生物的全部基因，而部分基因文庫(kù)（如cDNA文庫(kù)）中含有生物的部分基因．
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、2種引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（3）將轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)包括脫分化和再分化兩個(gè)階段．
（4）要檢查雜交細(xì)胞中是否具有A基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)，該技術(shù)用到DNA分子探針，常用同位素或熒光標(biāo)記．
故答案為：
（1）篩選  部分
（2）DNA模板    2種引物
（3）植物組織培養(yǎng)   脫分化    再分化
（4）DNA分子雜交    同位素（同位素標(biāo)記）

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．