Question

（7分）P5CS是植物合成脯氨酸的關(guān)鍵酶，脯氨酸有助于植物抵御干旱。下圖是將P5CS基因轉(zhuǎn)入煙草細(xì)胞獲得耐旱煙草植株過程的示意圖。

請回答:

（1）要將P5CS基因成功插入Ti質(zhì)粒中，Ti質(zhì)粒的 中應(yīng)含有HindⅢ、SalⅠ限制酶切割位點(diǎn)。③過程需在農(nóng)桿菌的培養(yǎng)基中添加 才能篩選出含P5CS基因的Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。

（2）檢測P5CS基因是否整合到煙草細(xì)胞染色體DNA上，采用 技術(shù)，轉(zhuǎn)基因是否成功可以直接在個體水平上對轉(zhuǎn)基因植物與非轉(zhuǎn)基因植物的 性進(jìn)行比較。

（3）將轉(zhuǎn)入P5CS基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用 技術(shù)，愈傷組織通過 發(fā)育成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加 。

Answer 1

（1）T—DNA 四環(huán)素 （2）DNA分子雜交 抗旱/耐旱

(3)植物組織培養(yǎng) 再分化（細(xì)胞增殖和分化） 植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)

【解析】

試題分析：（1）質(zhì)粒中的T—DNA又稱為可轉(zhuǎn)移的DNA，可以將攜帶的目的基因轉(zhuǎn)移到受體植物細(xì)胞的染色體中去，所以該基因工程要成功，最好將目的基因重組到T—DNA中；因此Ti質(zhì)粒的T—DNA中應(yīng)含有HindⅢ、SalⅠ限制酶切割位點(diǎn)。由于重組質(zhì)粒中含有完整的抗四環(huán)素基因，因此③過程需在農(nóng)桿菌的培養(yǎng)基中添加四環(huán)素才能篩選出含P5CS基因的Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。

（2）檢測目的基因（P5CS基因）是否整合到煙草細(xì)胞染色體DNA上，應(yīng)采用DNA分子雜交技術(shù)；根據(jù)題意，P5CS是植物合成脯氨酸的關(guān)鍵酶，脯氨酸有助于植物抵御干旱，因此轉(zhuǎn)基因是否成功可以直接在個體水平上對轉(zhuǎn)基因植物與非轉(zhuǎn)基因植物的抗旱性進(jìn)行比較。

（3）將轉(zhuǎn)入目的基因（P5CS基因）的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，愈傷組織通過再分化發(fā)育成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加生長素和細(xì)胞分裂素。

考點(diǎn)：本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力。