Question

20．乳酸菌是人和動物體胃腸道中的有益菌，能助消化，利于腸道健康，但是消化道中膽汁所含的膽鹽會對乳酸菌的生理活動有抑制作用，為此，研究人員通過輻射處理野生型乳酸菌，得到耐高濃度膽鹽的乳酸菌．
（1）與腐乳制作所用微生物相比，乳酸菌在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是無核膜包被的成形細(xì)胞核．
（2）實(shí)驗(yàn)步驟：
①育種與培養(yǎng)：輻射處理后可得到多種類型的乳酸菌，置于經(jīng)過高壓蒸汽滅菌法滅菌處理的液體（固體、液體）培養(yǎng)基中，37℃震蕩培養(yǎng)．
②接種與選擇：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行系列稀釋（或“梯度稀釋”）處理．之后，將菌液涂布接種于含0.3%膽鹽和不含膽鹽的固體培養(yǎng)基上，配置時(shí)為了使培養(yǎng)基凝固，應(yīng)向培養(yǎng)基中加入瓊脂；置于37℃條件下密閉（密閉、充氣）培養(yǎng)．不含膽鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是對照．
③篩選與純化：從平板中聽取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株，采用平板劃線法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對菌株進(jìn)一步的純化．

Answer 1

分析 1、原核細(xì)胞和真核細(xì)胞最主要的區(qū)別就是原核細(xì)胞沒有核膜包被的典型的細(xì)胞核；它們的共同點(diǎn)是均具有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核糖體和遺傳物質(zhì)DNA．
2、從混合樣品中獲得某種微生物的方法通常有兩種：
第一種是可利用該分離對象對某一營養(yǎng)物質(zhì)有一“嗜好”的原理，專門在培養(yǎng)基中加入或不加該營養(yǎng)物質(zhì)，從而使它成為一種選擇培養(yǎng)基（如在含高濃度NaCl的培養(yǎng)基上分離金黃色葡萄糖球菌，在不含N的培養(yǎng)基上分離圓褐固氮菌）；或根據(jù)分離對象對pH、溫度和氧氣濃度的喜好，改變培養(yǎng)環(huán)境的理化性質(zhì)，使環(huán)境條件最適宜該微生物的生存，從而達(dá)到分離的目的，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物．
第二種辦法可利用該分離對象對某種抑菌物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物，經(jīng)培養(yǎng)后，原來占優(yōu)勢的微生物生長受抑制，而分離對象卻可乘機(jī)大大增殖，使之在數(shù)量上占優(yōu)勢（如在加入青霉素的培養(yǎng)基上分離真核微生物）．

解答 解：（1）腐乳制作所用微生物主要是毛霉，毛霉屬于真核生物中的真菌，乳酸菌屬于原核生物中的細(xì)菌，原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是無核膜包被的成形細(xì)胞核．
（2）①培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，而培養(yǎng)輻射處理后可得到多種類型的乳酸菌，置于液體培養(yǎng)基中，37℃震蕩培養(yǎng)．
②為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行系列稀釋（或“梯度稀釋”）處理．之后，將菌液涂布接種于含0.3%膽鹽和不含膽鹽的固體培養(yǎng)基上，配置時(shí)為了使培養(yǎng)基凝固，應(yīng)加入瓊脂作為凝固劑；由于乳酸菌屬于異養(yǎng)厭氧型，因此需要置于37℃條件下密閉培養(yǎng)．不含膽鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是對照．
③從平板中提取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株，采用平板劃線法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對菌株進(jìn)一步的純化．
故答案為：
（1）無核膜包被的成形細(xì)胞核
（2）①高壓蒸汽滅菌 液體
②系列稀釋（或“梯度稀釋”）     瓊脂  密閉  對照
③平板劃線

點(diǎn)評 本題考查了微生物分離與培養(yǎng)基以及原核細(xì)胞和真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的異同點(diǎn)等有關(guān)知識，要求考生能夠識記原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的種類以及結(jié)構(gòu)的異同點(diǎn)，掌握微生物分離與純化的一般方法，再結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確答題．