Question

8．回答有關(guān)微生物培養(yǎng)和篩選的問題
空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降．某研究小組欲用平板（培養(yǎng)基）收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況．實(shí)驗(yàn)步驟如下：
①配制培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H₂O）；
②制作無菌平板（培養(yǎng)基）；
③設(shè)置空白對照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；
④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)．
請回答下列問題：
（1）該培養(yǎng)基中微生物所需的氮源是牛肉膏和蛋白胨，成分X通常是瓊脂．
（2）步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是將不同平板分別置于教室中的將各實(shí)驗(yàn)組平板放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間，敞口靜置一段時間．
（3）若在某次調(diào)查中，某一高度實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中培養(yǎng)基出現(xiàn)了（微生物）污染現(xiàn)象．若將30（即36-6）個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法不正確（填“正確”或“不正確”）．
（4）若想確定平板上的菌落是否有大腸桿菌，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入伊紅--美藍(lán)；若要篩選出空氣中的真菌，應(yīng)加入抗生素．
枯草芽孢桿菌廣泛分布在含淀粉豐富的土壤中．若要從土壤中分離篩選出能高效降解淀粉的枯草芽孢桿菌，另一研究小組做了如下實(shí)驗(yàn)：
①制備土壤稀釋液：取土樣與水充分混合，放入錐形瓶中，常壓80℃的水浴處理樣品1小時后，取出冷卻．然后制成10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5不同稀釋度的土壤溶液．
②用無菌滴管吸取1ml10^-5菌液，用稀釋涂布平板法法接種于以淀粉為唯一碳源的平板上．
③將平板于37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-3d后，加入碘液，觀察菌落周圍白色區(qū)域，如圖所示．
（5）若要大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化該淀粉酶，則首選的菌株是B．

Answer 1

分析 微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用．

解答 解：（1）牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物，都可以作為氮源；平板為固體培養(yǎng)基，故需要加入瓊脂． （2）實(shí)驗(yàn)探究的是教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布，其中自變量為不同高度，故需在不同高度下放置開蓋平板．同時，為了保證單一變量，需要保證開蓋放置時間一致；為了保證實(shí)驗(yàn)可靠，需要設(shè)置多個平行實(shí)驗(yàn)．
（3）在完全正確的操作情況下，空白對照組中不應(yīng)出現(xiàn)菌落．若出現(xiàn)菌落，說明操作過程中存在微生物污染，屬于實(shí)驗(yàn)失誤，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均不應(yīng)采用．
（4）鑒別大腸桿菌常用伊紅和美藍(lán)，這種培養(yǎng)基稱為鑒別培養(yǎng)基．若要篩選出空氣中的真菌，應(yīng)加入抗生素．
根據(jù)實(shí)驗(yàn)步驟可知，實(shí)驗(yàn)將土壤溶液稀釋成不同濃度，并且實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑閺耐寥乐蟹蛛x篩選出能高效降解淀粉的枯草芽孢桿菌，因此需要用無菌滴管吸取1ml10^-5菌液，用稀釋涂布平板法法接種于以淀粉為唯一碳源的平板上．
（5）若要大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化該淀粉酶，需要選取產(chǎn)生淀粉酶最多的菌株，而圖中B的透明圈最大，因此B菌落產(chǎn)生的淀粉酶最多，因此首選的菌株是B．
故答案為：
（1）牛肉膏和蛋白胨  瓊脂
（2）將各實(shí)驗(yàn)組平板放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間 
（3）（微生物）污染   不正確
（4）伊紅--美藍(lán)    抗生素    稀釋涂布平板法    淀粉
（5）B

點(diǎn)評 本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生能夠識記不同的培養(yǎng)基成分為微生物提供的營養(yǎng)元素，掌握微生物分離與純化的方法，再結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確答題．