Question

近十年來(lái)，動(dòng)物細(xì)胞工程發(fā)展出一系列的技術(shù)，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題．
（1）動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等技術(shù)的基礎(chǔ)是

 

．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是

 

，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需要添加

 

作為特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)．
（3）已知IgG抗體能消除狂犬病病毒．特異性IgG抗體獲取也可用單克隆抗體制備法，如圖是單克隆抗體的制備過(guò)程示意圖，請(qǐng)回答下列問(wèn)題．

①?gòu)男∈蟮钠⑴K中取得B淋巴細(xì)胞之前，給小鼠注射的物質(zhì)A是

 

，目的是為了

 

．
②動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)方法外，還可以采用的方法是

 

．
③根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類，圖中HAT培養(yǎng)基屬于

 

培養(yǎng)基．
④B過(guò)程的目的是

 

．
⑤單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是

 

．
⑥在雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的

 

．此時(shí)，瓶壁上形成細(xì)胞層數(shù)是

 

．要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，需要用酶處理，可用的酶是

 

．
⑦在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)細(xì)胞衰老甚至死亡降低，但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其根本原因是

 

，而且，該種細(xì)胞不再具有貼壁能力，原因是細(xì)胞表面的

 

減少．

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過(guò)程

專題：

分析：1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．
3、細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁．細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．

解答： 解：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等技術(shù)的基礎(chǔ)．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞分裂（細(xì)胞增殖），動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需要添加動(dòng)物血清作為特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)．
（3）①?gòu)男∈蟮钠⑴K中取得B淋巴細(xì)胞之前，給小鼠注射的物質(zhì)A是狂犬病病毒，目的是為了獲得能夠產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞．
②動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)方法外，還可以采用的方法是滅活的病毒．
③圖中HAT培養(yǎng)基可篩選出雜交瘤細(xì)胞，屬于選擇培養(yǎng)基．
④B是第二次篩選過(guò)程，其目的是篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．
⑤單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備．
⑥接細(xì)胞的接觸抑制：細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖．由于接觸抑制，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，瓶壁上只能形成的單層細(xì)胞．可以用胰蛋白酶處理使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)．
⑦在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)細(xì)胞衰老甚至死亡降低，但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其根本原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變，而且，由于該種細(xì)胞表面的糖蛋白減少，細(xì)胞不再具有貼壁能力．
故答案為：
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
（2）細(xì)胞分裂（細(xì)胞增殖）       動(dòng)物血清
（3）①狂犬病病毒     獲得能夠產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞
②滅活的病毒
③選擇
④篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞
⑤特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備
⑥接觸抑制         單層（或一層）      胰蛋白酶
⑦原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變        糖蛋白

點(diǎn)評(píng)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和單克隆抗體的制備等知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理、過(guò)程及意義；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，難度不大，只要平時(shí)多加訓(xùn)練即可準(zhǔn)確答題．