Question

5．以下是一種分離土壤中纖維素分解菌的培養(yǎng)基配方：纖維素粉5g、NaNO₃ 1g、Na₂HPO₄•7H₂O 1.2g、KH₂PO₄0.9g、MgSO₄．7H₂O0.5g、KCl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g（蒸餾水定容到1000mL）．請回答：
（1）培養(yǎng)基的種類很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽，該培養(yǎng)基中纖維素粉（或纖維素）是最主要的碳源，按培養(yǎng)基的功能劃分屬于選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基配制完成后，一般還要調(diào)節(jié)PH值，并對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理．
（2）分離純化微生物最常使用的接種方法是平板劃線法 和稀釋涂布平板法．
（3）為了鑒別纖維素分解菌和進(jìn)一步純化菌種，可以在鑒別培養(yǎng)基上加入剛果紅染液，將篩選獲得的菌液稀釋后用涂布平板法（或稀釋涂布平板法）法接種到鑒別培養(yǎng)基上，假設(shè)某同學(xué)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上此種細(xì)菌數(shù)目過多連成一片，可能的原因是菌液濃度過高（或稀釋倍數(shù)不夠）．
（4）如果探究溫度對纖維素酶活性的影響，自變量是溫度，PH值等無關(guān)變量保持相同且適宜．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．
2、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

3、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽；該培養(yǎng)基中纖維素粉（或纖維素） 是最主要的碳源；該培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源，只有能分解纖維素的微生物才能生長，因此按培養(yǎng)基的功能劃分屬于選擇培養(yǎng)基；培養(yǎng)基配制完成后，一般還要調(diào)節(jié)PH值，并對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理．
（2）分離純化微生物最常使用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（3）在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．因此，為了鑒別纖維素分解菌和進(jìn)一步純化菌種，可以在鑒別培養(yǎng)基上加入剛果紅染液，將篩選獲得的菌液稀釋后用涂布平板法（或稀釋涂布平板法 ）法接種到鑒別培養(yǎng)基上；如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上此種細(xì)菌數(shù)目過多連成一片，可能的原因是菌液濃度過高（或稀釋倍數(shù)不夠）．
（4）探究溫度對纖維素酶活性的影響的實驗中，自變量是溫度，PH值等無關(guān)變量保持相同且適宜．
故答案為：
（1）氮源      纖維素粉（或纖維素）       選擇         滅菌
（2）平板劃線法     稀釋涂布平板法
（3）剛果紅      涂布平板法（或稀釋涂布平板法 ）    菌液濃度過高（或稀釋倍數(shù)不夠）
（4）溫度

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、種類及功能；識記接種微生物常用的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項．