Question

如圖所示為利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育具有某種抗鹽性狀的植株的流程圖，請(qǐng)回到以下問(wèn)題：
（1）質(zhì)粒DNA呈

 

（“鏈狀”或“環(huán)狀”）．將抗體基因從DNA分子切割下來(lái)所用工具酶是

 

，該酶的特點(diǎn)是

 

．
（2）獲取目的基因后，還需要適當(dāng)?shù)妮d體，基因工程常用的載體有

 

等三種．將目的基因與完整的載體拼接在一起，還要用到另外一種工具酶，即

 

，該操作用到的其中一種酶與獲得目的基因的所用的酶有什么限制？

 

．
（3）圖中的受體菌指的是

 

，從分子水平檢測(cè)植株內(nèi)是否有目的基因的方法有

 

，除此以外，從個(gè)體水平上可以采用的方法是

 

．
（4）該育種方法所利用的生物技術(shù)有

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的具體過(guò)程：
（1）利用土壤的Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，即將目的基因整合到土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上．
（2）將整合了目的基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)．
（3）利用土壤農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，該過(guò)程實(shí)際上是將含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞內(nèi)．
（4）含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒進(jìn)入植物細(xì)胞后，可以把自己的一段基因整合到細(xì)胞核中的染色體上，這段基因中包含了目的基因．
原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上．根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上．

解答： 解：（1）質(zhì)粒DNA呈環(huán)狀．將抗體基因從DNA分子切割下來(lái)所用工具酶是限制酶，能識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列，具有專一性．
（2）基因工程常用的載體有質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒和噬菌體等三種．將目的基因與完整的載體拼接在一起，需要用到同一種限制酶和DNA連接酶．
（3）圖中的受體菌指的是農(nóng)桿菌，從分子水平檢測(cè)植株內(nèi)是否有目的基因可用DNA分子雜交的方法，也可從個(gè)體水平上，將該植物種植在鹽濃度較高的土壤上，觀察植株的生長(zhǎng)狀況．
（4）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育具有某種抗鹽性狀的植株所利用的生物技術(shù)有重組DNA分子技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
故答案為：
（1）環(huán)狀    限制酶    識(shí)別特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位點(diǎn)
（2）質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒和噬菌體    DNA連接酶    同一種限制酶
（3）農(nóng)桿菌    DNA分子雜交     將該植物種植在鹽濃度較高的土壤上，觀察植株的生長(zhǎng)狀況
（4）重組DNA分子技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合利用農(nóng)桿菌培育轉(zhuǎn)基因植物的流程圖，考查基因工程和植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的具體過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．