Question

白細(xì)胞介素是一類淋巴因子，有助于流感的治療．研究人員將人白細(xì)胞介素的基因?qū)�入到酵母�?xì)胞中，使其分泌出有活性的人白細(xì)胞介素．
（1）在體液免疫過(guò)程中，白細(xì)胞介素是由細(xì)胞

 

分泌的，可作用于受到抗原刺激的B細(xì)胞，使B細(xì)胞增殖、分化，形成

 

細(xì)胞．
（2）通過(guò)PCR擴(kuò)增獲取目的基因：從健康人體外周靜脈血分離得到淋巴細(xì)胞，于37℃培養(yǎng)48h，提取細(xì)胞總RNA，生成

 

．根據(jù)已知目的基因的核苷酸序列，人工合成，將以上物質(zhì)連同

 

，置于PCR儀中，即可獲得白細(xì)胞介素基因．
（3）重組載體的構(gòu)建（如圖）：酶EcoRⅠ與EcoR52處理載體和目的基因后，用

 

處理，形成重組載體．該載體與細(xì)胞膜載體的化學(xué)本質(zhì)分別是

 

和

 

．
（4）如果你利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，來(lái)驗(yàn)證基因工程純化的產(chǎn)物是否符合要求，你的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖?div id="a1qq4ap" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

．

Answer 1

考點(diǎn)：人體免疫系統(tǒng)在維持穩(wěn)態(tài)中的作用,基因工程的原理及技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程

專題：

分析：分析題圖：圖示表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，載體和目的基因都有限制酶EcoRⅠ與EcoR52的切割位點(diǎn)，所以切割載體和目的基因時(shí)用限制酶EcoRⅠ與EcoR52，再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組載體．

解答： 解：（1）白細(xì)胞介素是一種淋巴因子，在體液免疫過(guò)程中，是由T細(xì)胞分泌的；B細(xì)胞能增殖、分化形成漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞．
（2）以RNA為模板合成cDNA稱為逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄），該過(guò)程需要模板（RNA）、酶（逆轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶）、原料（脫氧核苷酸）和能量．采用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲取目的基因時(shí)需要模板（cDNA）、酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）、原料（脫氧核苷酸）、引物．因此，根據(jù)已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通過(guò)PCR擴(kuò)增獲取目的基因，此時(shí)需要加入的反應(yīng)物與生成cDNA時(shí)所加反應(yīng)物不同的是：模板cDNA、耐高溫（熱穩(wěn)定）DNA聚合酶（Taq酶）、引物．
（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需先用兩種限制酶EcoR1與EcoR52處理載體和目的基因后，再用DNA連接酶處理，形成重組載體．該載體的化學(xué)本質(zhì)是DNA，而細(xì)胞膜上載體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)．
（4）利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，來(lái)驗(yàn)證基因工程純化的產(chǎn)物白細(xì)胞介素是否符合要求，故實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證純化產(chǎn)物可以促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖．
故答案為：
（1）T    漿細(xì)胞和記憶
（2）cDNA   引物耐高溫的DNA聚合酶和四種dNTP
（3）DNA連接酶     DNA     蛋白質(zhì)
（4）驗(yàn)證純化產(chǎn)物可以促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合圖解，綜合考查免疫、基因工程、PCR技術(shù)、微生物的培養(yǎng)和分離等知識(shí)，要求考生識(shí)記人體免疫細(xì)胞的組成及特異性免疫過(guò)程；識(shí)記基因工程的工具及操作步驟；掌握純合微生物的方法，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)答題．