Question

14．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但尿素只有通過(guò)土壤中某些細(xì)菌分解為氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？不能（能/不能），原因是培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物．
（2）要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)目（平均菌落數(shù)）就能大約推測(cè)出樣品中活菌數(shù)．常用的微生物接種方法還有平板劃線(xiàn)法，此接種法在做第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)總是從上次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)的原因是將聚集的菌種逐步稀釋分散，從而獲得由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落．
（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基的概念是：在微生物學(xué)中，將允許特定微生物種類(lèi)生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱(chēng)為選擇培養(yǎng)基，由于分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上，分解尿素的菌能以尿素為氮源生長(zhǎng)，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而無(wú)法生長(zhǎng)．
2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法，稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)�然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，獲得由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落．

解答 解：（1）由圖中培養(yǎng)基的配方可知，該培養(yǎng)基中，能提供氮源的是蛋白胨和尿素，不能利用尿素的菌可以以蛋白胨為氮源生長(zhǎng)，所以不能分離出分解尿素的菌．
（2）微生物常用的接種方法是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法，由于圖涂布平板時(shí)，可以確定涂布的體積，因此要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種；根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的平均菌落數(shù)，進(jìn)而推出出樣品中活菌數(shù)．平板劃線(xiàn)法時(shí)，第一次灼燒接種環(huán)的目的是殺滅雜菌，在做第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)總是從上次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)的目的是 將聚集的菌種逐步稀釋分散，從而獲得由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落．
（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，為防止培養(yǎng)的微生物污染環(huán)境，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌．
故答案為：
（1）不能　      培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物
（2）稀釋涂布平板     菌落數(shù)目（平均菌落數(shù)）    平板劃線(xiàn)法    將聚集的菌種逐步稀釋分散，從而獲得由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落
（3）滅菌

點(diǎn)評(píng) 本題旨在考查學(xué)生對(duì)選擇培養(yǎng)基的選擇作用、稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法接種微生物、微生物培養(yǎng)的無(wú)菌操作等技術(shù)的熟練掌握和應(yīng)用．