6．表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)．請回答下列問題：

限制酶	BamHⅠ	HnidⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
識別序列及切割位點(diǎn)

（1）一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有0、2個游離的磷酸基團(tuán)．
（2）若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高．
（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割的原因SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因．
（4）與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化
（5）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在蔗糖為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測．
（6）基因工程中利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)α-抗胰蛋白酶，應(yīng)選用同種限制酶切割含有目的基因的DNA片段和載體，并用顯微注射方法導(dǎo)入受精卵中，再利用SRY探針 （Y染色體上的性別決定基因）進(jìn)行檢測，將檢測反應(yīng)呈陰性（選填“陽”、“陰”）性的胚胎進(jìn)行移植培養(yǎng)．

5．現(xiàn)在可用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素，請回答相關(guān)問題

（1）此基因工程中的目的基因是人胰島素基因，要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以采用PCR技術(shù)．在培育轉(zhuǎn)基因番茄的過程中所用基因的“剪刀”是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），基因的“運(yùn)載工具”是運(yùn)載體（質(zhì)粒）．將人工合成的DNA片段拼接在一起，所需要的酶有DNA連接酶．
（2）將重組質(zhì)粒放入番茄植株的受體細(xì)胞中常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）為從根本上解決水稻中的高植酸問題，可將植酸酶基因?qū)�入水稻，培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種．下圖是獲取植酸酶基因的流程．
據(jù)圖回答：
①圖中基因組文庫大于（小于/等于/大于）cDNA文庫．
②B過程需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶；A、C過程中可以（可以/不可以）使用同一種探針篩選含目的基因的菌株．

4．一對表現(xiàn)型正常的夫婦，他們的雙親中都有一個白化病患者，預(yù)計(jì)他們生一個白化病男孩（　�。�

A．

$\frac{1}{44}$

B．

$\frac{1}{8}$

C．

$\frac{3}{8}$

D．

$\frac{1}{4}$

3．圖甲表示某細(xì)菌的質(zhì)粒中相關(guān)限制酶的切割位點(diǎn)，圖乙表示目的基因所在的DNA中相關(guān)限制酶的切割位點(diǎn)．請分析并回答下列問題：

（1）用Sma l限制酶處理圖甲所示的質(zhì)粒會得到2個DNA片段，用AluⅠ處理圖乙所示的外源DNA會增加2個游離的磷酸基團(tuán)．
（2）為了避免目的基因和質(zhì)粒在酶切后產(chǎn)生的片段發(fā)生自身環(huán)化或任意連接，以及便于篩選需要，在實(shí)際操作中，一般應(yīng)選用PstI和HindⅢ（填限制酶名稱）同時酶切質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA．再用DNA連接酶處理．如果是用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，設(shè)計(jì)引物是關(guān)鍵，但在擴(kuò)增時退火溫度一般為55℃一60℃，對于（A+T）%＞50%，一般用55℃；（A+T）%≤50%時一般用60℃，原因是G與C（之間是三個氫鍵）比例越高越穩(wěn)定[或A與T（之間是二個氫鍵）比例越高越不穩(wěn)定]．
（3）為了篩選獲得含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，實(shí)驗(yàn)人員首先將經(jīng)轉(zhuǎn)化處理過的大腸桿菌接種在含四環(huán)素（抗生素）的培養(yǎng)基中，然后用影印法將該培養(yǎng)基上的菌落按原來的方向印在含氯霉素（抗生素）培養(yǎng)基上，以篩選獲得含重組質(zhì)粒的細(xì)菌．在含四環(huán)素培養(yǎng)基中能生長繁殖，而在含氯霉素培養(yǎng)基中不能生長繁殖的是導(dǎo)人了重組質(zhì)粒（或目的基因）的大腸桿菌．

（4）經(jīng)檢測：在上述導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中，目的基因正常轉(zhuǎn)錄形成了mRNA，但其所控制合成的蛋白質(zhì)卻并不具有生物活性，最可能的原因是大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)缺乏內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體（或大腸桿菌缺乏生物膜系統(tǒng)），不能對多肽鏈進(jìn)行加工（折疊、組裝與修飾）．

2．科學(xué)家僅使用小分子化合物的組合對體細(xì)胞進(jìn)行處理，成功地將已高度分化的小鼠成纖維上皮細(xì)胞誘導(dǎo)成多潛能干細(xì)胞，并將其命名為化學(xué)誘導(dǎo)的多潛能干細(xì)胞（GiPS細(xì)胞）．圖是利用GiPS細(xì)胞對鐮刀形細(xì)胞貧血癥小鼠進(jìn)行基因治療的技術(shù)流程：

請據(jù)圖回答：
（1）過程①中，在培養(yǎng)液中加入胰蛋白酶使上皮組織細(xì)胞彼此分散，若用傳代培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)不超過10代，以保證細(xì)胞的正常的二倍體核型（遺傳物質(zhì)）不發(fā)生變化．
（2）科學(xué)家用小分子化合物的組合對小鼠成纖維上皮細(xì)胞進(jìn)行處理，促使已經(jīng)（高度）分化的成纖維細(xì)胞“重新編程”產(chǎn)生GiPS細(xì)胞，這些GiPS細(xì)胞與囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞性質(zhì)相同．
（3）過程③中，導(dǎo)入的重組質(zhì)粒中調(diào)控目的基因表達(dá)的組件是啟動子和終止子，標(biāo)記基因的作用是鑒別和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞．
（4）若利用GiPS細(xì)胞誘導(dǎo)分化形成早期胚胎（桑椹胚、囊胚），再經(jīng)胚胎移植技術(shù)，可較容易得到高等動物的體細(xì)胞克隆個體．
（5）GiPS細(xì)胞經(jīng)體外誘導(dǎo)分化，可以直接培育出人造組織器官．圖中培育骨髓造血干細(xì)胞移植回該小鼠體內(nèi)與異體骨髓造血干細(xì)胞移植相比，最大的優(yōu)點(diǎn)是不出現(xiàn)免疫排斥反應(yīng)．

1．質(zhì)粒能成功轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞，并將質(zhì)粒上的一部分外源DNA整合到植物的DNA中．如圖表示利用質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)化獲得抗除草劑大豆的過程．請據(jù)圖分析回答：

（1）過程②將目的基因?qū)�入質(zhì)粒后，需要借助DNA連接酶使質(zhì)粒與目的基因的切口黏合．
（2）過程③沒有（有/沒有）進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對．
（3）目的基因在大豆細(xì)胞中的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個過程．
（4）過程④得到試管苗的關(guān)鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和植物激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行脫分化和再分化．
（5）為了檢測通過④過程獲得的幼苗是否具有抗除草劑的特性，可采用的方法是對該幼苗噴施除草劑，觀察其生長情況．

20．下列有關(guān)基因工程操作的敘述中，錯誤的是（　�。�

	A．	用同種限制酶切割載體和目的基因可獲得相同的黏性末端
	B．	PCR技術(shù)利用的Taq酶屬于DNA聚合酶
	C．	檢測到受體細(xì)胞含有目的基因就標(biāo)志著基因工程已操作成功
	D．	用標(biāo)記的目的基因作探針可檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA

19．下列關(guān)于構(gòu)建基因表達(dá)載體的相關(guān)敘述中，錯誤的是（　�。�

	A．	需用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶
	B．	必須在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行
	C．	終止子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段
	D．	啟動子位于目的基因的首端

18．下列有關(guān)人體調(diào)節(jié)水平衡的相關(guān)敘述中，錯誤的是（　�。�

	A．	抗利尿激素通過血液運(yùn)輸后作用于腎小管和集合管細(xì)胞
	B．	人體攝取食物過咸，渴覺中樞和水平衡調(diào)節(jié)中樞均產(chǎn)生興奮
	C．	人體劇烈運(yùn)動導(dǎo)致大量出汗，此時下丘腦合成并釋放抗利尿激素
	D．	人體從30℃環(huán)境進(jìn)入0℃環(huán)境中，抗利尿激素分泌減少，尿量增加

17．如圖為現(xiàn)代版“�；�魚塘”農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的能量流動和物質(zhì)循環(huán)模式圖，據(jù)圖分析回答下列問題：

水深（米） 個體數(shù)量	物種甲	物種乙	物種丙
0.5	100	50	10
0.7	120	60	15
0.9	200	70	20
1.1	120	80	25
1.3	100	90	30
1.5	0	100	35
1.7	0	90	40
1.9	0	80	35
2.1	0	0	20
2.3	0	0	0

（1）圖中“?→�！北硎局参铮ㄉ＃┕夂献饔霉潭ㄌ�陽能．
（2）模式圖中“?→池塘”的箭頭是否正確？正確．理由是這一箭頭表示池塘中的植物光合作用固定的太陽能．
（3）如圖中所示，魚A在此農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中的成分是分解者．
（4）生態(tài)農(nóng)業(yè)比單一農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)效益高，從能量流動的角度來看，是因?yàn)樯鷳B(tài)農(nóng)業(yè)實(shí)現(xiàn)了能量的多級利用，提高了能量的利用率．
（5）在生態(tài)農(nóng)場中，把蠶的排泄物經(jīng)處理后作為農(nóng)作物肥料，可以減少化肥的使用，使農(nóng)作物增產(chǎn)，請從光合原理解釋農(nóng)作物增產(chǎn)的原因，蠶排泄物中的有機(jī)物被土壤中微生物分解，產(chǎn)生二氧化碳（和無機(jī)鹽）促進(jìn)植物的光合作用．
（6）調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該池塘內(nèi)存在一條由甲、乙、丙三種生物構(gòu)成的捕食食物鏈（以生產(chǎn)者為起點(diǎn)），甲、乙、丙在池塘中不同深度的分布狀況如上表所示．其中最可能是生產(chǎn)者的是甲．
（7）甲、乙、丙在生態(tài)學(xué)上是否可以構(gòu)成一個生物群落？否．原因是甲乙丙中缺少微生物（分解者）．