Question

【題目】微生物培養(yǎng)技術(shù)在醫(yī)療、工業(yè)生產(chǎn)、食品生產(chǎn)等方面均有應(yīng)用。下表是一種培養(yǎng)基的配方，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	瓊脂	水
0．5g	1g	0．5g	2g	200mL

（1）此培養(yǎng)基中的蛋白胨主要為微生物提供______________________。在各種成分溶化后、分裝前，必須進(jìn)行的操作是___________和滅菌。

（2）臨床使用抗生素前，有時(shí)需要進(jìn)行細(xì)菌的耐藥性試驗(yàn)，其大致過(guò)程是：將含有某種細(xì)菌的菌液用___________法接種在培養(yǎng)基表面并進(jìn)行培養(yǎng)，最終形成單個(gè)的菌落；再分別將含有等劑量不同種抗生素的相同大小的圓形濾紙片置于該平板上有菌落的位置，繼續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間后，若濾紙片下的菌落死亡，說(shuō)明該細(xì)菌對(duì)該抗生素___________（填“敏感”或“不敏感”）。

（3）用上述方法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，一般選擇菌落在___________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有___________（填序號(hào)）。

①由于培養(yǎng)基污染 ②沒(méi)有設(shè)置對(duì)照 ③由于操作失誤 ④由于土樣不同

（4）在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中，通常用___________法，這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行篩選。甲同學(xué)在實(shí)驗(yàn)時(shí)得到了如圖所示的結(jié)果，則纖維素分解菌位于___________。

A．①②③ B．②③ C．①② D．③

Answer 1

【答案】碳源、氮源和生長(zhǎng)因子 調(diào)節(jié)pH 稀釋涂布平板 敏感 30～300 ①③④ 剛果紅染色法 D

【解析】

1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，其基本過(guò)程為計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板五個(gè)步驟。
2、從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．篩選尿素分解菌應(yīng)該使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，配制培養(yǎng)基的一般操作是配制培養(yǎng)液、調(diào)整pH、分裝、包扎、滅菌、擱置斜面。微生物的計(jì)數(shù)常用稀釋涂布平板法接種，采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，要將培養(yǎng)皿倒置。

（1）培養(yǎng)基中的蛋白胨主要為微生物提供碳源、氮源和生長(zhǎng)因子。在各種成分溶化后分裝前，必須進(jìn)行的是調(diào)節(jié)pH和滅菌。
（2）臨床使用抗生素前，有時(shí)需要進(jìn)行細(xì)菌的耐藥性試驗(yàn)，其大致過(guò)程是：將含有某種細(xì)菌的菌液用稀釋涂布平板法接種在培養(yǎng)基表面并進(jìn)行培養(yǎng)，最終形成單個(gè)的菌落；再分別將含有等劑量不同種抗生素的相同大小的圓形濾紙片置于該平板上有菌落的位置，繼續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間后，若濾紙片下的菌落死亡，說(shuō)明該細(xì)菌對(duì)該抗生素敏感。
（3）微生物的計(jì)數(shù)常用稀釋涂布平板法接種，可以獲得單個(gè)菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，通常選擇菌落數(shù)在30～300間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落，分析A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有：①由于土樣不同、②由于培養(yǎng)基污染、③由于操作失誤，是否設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)不影響實(shí)驗(yàn)組的菌落數(shù)目。故對(duì)應(yīng)題干選①③④。
（4）剛果紅是一種染料，可與纖維素形成紅色復(fù)合物，但不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)，在含有纖維素的培養(yǎng)基上添加剛果紅時(shí)，會(huì)形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，據(jù)此就可以篩選出纖維素分解菌。據(jù)甲同學(xué)在實(shí)驗(yàn)時(shí)得到的圖示結(jié)果圖中①是培養(yǎng)皿，②是培養(yǎng)基，③以纖維素分解菌為中心的透明圈，所以纖維素分解菌位于其內(nèi)，故選D。