Question

11．如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．請回答：

限制酶	BamHI	HindⅢ	EcoRI	SmaI	MspI
識字序列及切割位點(diǎn)

（1）天然質(zhì)粒往往需經(jīng)過改造才能作為基因工程中的運(yùn)載體，經(jīng)改造后的質(zhì)粒同時具備的條件有①②③④（填序號）．
①標(biāo)記基因         ②多個限制酶切割位點(diǎn)    ③對受體細(xì)胞無害     ④啟動子       ⑤起始密碼子
（2）若對圖1中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性將會越高．
（3）用圖2中的人乳鐵蛋白目的基因和圖1所示的質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒時，選用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ（從“EcoRⅠ”、“BamHⅠ/HindⅢ”、“SmaⅠ/HindⅢ”中選擇）．不能選擇其他限制酶的理由分別是若選EcoRⅠ會破壞質(zhì)粒的復(fù)制原點(diǎn)、若選SmaⅠ/HindⅢ，則構(gòu)建的重組質(zhì)粒沒有標(biāo)記基因或復(fù)制原點(diǎn)．
（4）圖3中，①常用的導(dǎo)入方法是顯微注射法，為了獲得雌性轉(zhuǎn)基因牛，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定，③過程選用的早期胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段．

Answer 1

分析 分析題圖：圖1是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的過程，該過程采用了基因工程技術(shù)（①目的基因的獲取、②基因表達(dá)載體的構(gòu)建、③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、④目的基因的檢測與表達(dá)）、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)．

解答 解：（1）天然質(zhì)粒往往需經(jīng)過改造才能作為基因工程中的運(yùn)載體，經(jīng)改造后的質(zhì)粒同時具備的條件有①標(biāo)記基因、②多個限制酶切割位點(diǎn)、③對受體細(xì)胞無害和④啟動子，而⑤起始密碼子位于mRNA上．
（2）堿基之間的配對遵循堿基互補(bǔ)配對原則，即C-G，A-T，且C和G之間有3個氫鍵，A和T之間有2個氫鍵，因此C和G的含量越高，DNA分子熱穩(wěn)定性也越高．SmaⅠ酶切位點(diǎn)中均為C-G堿基對，因此插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒中的C和G的含量就越高，其熱穩(wěn)定性也越高．
（3）若選EcoRⅠ會破壞質(zhì)粒的復(fù)制原點(diǎn)；若選SmaⅠ/HindⅢ，則構(gòu)建的重組質(zhì)粒沒有標(biāo)記基因或復(fù)制原點(diǎn)，所以用圖2中的人乳鐵蛋白目的基因和圖1所示的質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒時，選用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ．
（4）過程①是將目的基因?qū)�入動物受精卵，所用方法是顯微注射法；為了獲得雌性轉(zhuǎn)基因牛，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定；過程③是將早期胚胎移入代孕母體中所用技術(shù)為胚胎移植，時期是發(fā)育到桑椹胚或囊胚的早期胚胎．
故答案為：
（1）①②③④
（2）越高
（3）BamHⅠ/HindⅢ若選EcoRⅠ會破壞質(zhì)粒的復(fù)制原點(diǎn)；若選SmaⅠ/HindⅢ，則構(gòu)建的重組質(zhì)粒沒有標(biāo)記基因或復(fù)制原點(diǎn)
（4）顯微注射法     性別鑒定    桑椹胚或囊胚

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖表，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作工具及其特點(diǎn)；識記基因工程的操作步驟，掌握其應(yīng)用，能根據(jù)圖中和表中信息選擇合適的限制酶，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．