Question

（12分）科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如下圖，請(qǐng)回答相關(guān)問題：

（1）過程①獲得重組胚胎之前需要通過__________________技術(shù)獲得重組細(xì)胞，接受細(xì)胞核的去核卵母細(xì)胞應(yīng)該處于___________________時(shí)期。

（2）步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其_______________分離出ES細(xì)胞。步驟③中，需要構(gòu)建含有干擾素基因的__________________。構(gòu)建之前可以利用_____________________技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。

（3）將基因?qū)�入ES細(xì)胞常用的方法是________________________。體外誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同方向分化是利用了ES細(xì)胞的_________________。

（4）為檢測干擾素基因的表達(dá)情況，可采用__________________方法，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已成功表達(dá)。

Answer 1

（1）核移植 MⅡ

（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán) （基因）表達(dá)載體 PCR

（3）顯微注射 全能性

（4）抗原一抗體雜交

【解析】

試題分析：

（1）把上皮細(xì)胞導(dǎo)入去核的卵母細(xì)胞的過程為細(xì)胞核移植，可以得到重組細(xì)胞，通過培養(yǎng)獲得重組胚胎；去核的卵母細(xì)胞必須培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才用于核移植。

（2）過程②為早期胚胎培養(yǎng)，在囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞即為胚胎干細(xì)胞；步驟③為導(dǎo)入外源基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體后才能導(dǎo)入受體細(xì)胞；構(gòu)建基因表達(dá)載體之前可以用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。

（3）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法；ES細(xì)胞可以誘導(dǎo)向不同的方向分化，利用的ES的全能性的特點(diǎn)。

（4）目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)通過轉(zhuǎn)錄和翻譯合成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，說明了目的基因已經(jīng)成功表達(dá)，而檢測蛋白質(zhì)的方法是抗原—抗體雜交，如果出現(xiàn)雜交帶，說明了目的基因已經(jīng)完成了表達(dá)。

考點(diǎn)：本題考查細(xì)胞工程、基因工程的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)圖能力、識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。