Question

（15分）[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題] Ⅰ.土壤農(nóng)桿菌能將自身Ti質(zhì)粒的T-DNA整合到植物染色體DNA上，誘發(fā)植物形成腫瘤。T-DNA中含有植物生長(zhǎng)素合成酶基因（S）和細(xì)胞分裂素合成酶基因（R）,如圖1所示，它們的表達(dá)與否能影響相應(yīng)植物激素的含量，進(jìn)而調(diào)節(jié)腫瘤組織的生長(zhǎng)與分化。基因工程常用Ti質(zhì)粒作為運(yùn)載體，圖2表示抗蟲(chóng)棉培育中使用的三種限制酶A、B、C的識(shí)別序列以及Ti質(zhì)粒上限制酶切割位點(diǎn)的分布，抗蟲(chóng)基因內(nèi)部不含切割位點(diǎn)，兩側(cè)標(biāo)明序列為切割區(qū)域。

（1）據(jù)圖2分析，切取抗蟲(chóng)基因時(shí)，使用限制酶 ，切割Ti質(zhì)粒時(shí)，使用限制酶 。

（2）成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含有限制酶A的識(shí)別位點(diǎn)0個(gè)，若用酶C處理該重組質(zhì)粒，將得到 個(gè)DNA片段。

（3）若抗蟲(chóng)基因插入的位置在R基因內(nèi)部，篩選出 植株即是成功導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因的棉花植株。

Ⅱ.單克隆抗體技術(shù)在生物工程中占有重要地位。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：

（4）科學(xué)家米爾斯坦和柯勒提出單克隆抗體制備技術(shù)的實(shí)驗(yàn)方案：把一種 細(xì)胞與能在體外大量增殖的___________細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合，使融合細(xì)胞既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。

（5）在技術(shù)操作中，需要將融合細(xì)胞用 培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，并進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和 檢測(cè)，以得到足夠數(shù)量的符合要求的 （填“單”、“雙”、“多”）核雜交瘤細(xì)胞。

（6）若將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，可從 中提取出大量的單克隆抗體。

（7）研究人員應(yīng)用 ，改造了鼠源性抗體分子的結(jié)構(gòu)，降低了鼠源性抗體的人體反應(yīng)。

Answer 1

Ⅰ. (1)酶B和酶C 酶A和酶B （2）2 （3）生根瘤

Ⅱ.（4）B淋巴 骨髓瘤 （5）特定的選擇性（必答“選擇”） 抗體檢測(cè) 單

（6）（細(xì)胞）培養(yǎng)液 （7）蛋白質(zhì)工程

【解析】

試題分析：Ⅰ.（1）分析圖2可知，抗蟲(chóng)基因左側(cè)序列中含有酶B的識(shí)別序列，右側(cè)含有酶C的識(shí)別序列，所以切去目的基因應(yīng)使用限制酶B和酶C；Ti質(zhì)粒的T-DNA區(qū)段含有酶A和酶B的識(shí)別位點(diǎn)，所以切割Ti質(zhì)粒時(shí)，使用限制酶A和酶B。

（2）成功構(gòu)建的重組質(zhì)粒用酶C處理能得到2個(gè)DNA片段，應(yīng)是A-C和C-A片段。

（3）若抗蟲(chóng)基因插入的位置在R基因內(nèi)部，則R基因結(jié)構(gòu)被破壞失去原有的功能，即R基因不表達(dá)；但S基因正常表達(dá)，所以根據(jù)圖1可知篩選出生根瘤植株即是成功導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因的棉花植株。

Ⅱ.（4）米爾斯坦和柯勒在單克隆抗體制備時(shí)，把經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合，使融合細(xì)胞既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。

（5）操作中，需要將融合細(xì)胞用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，并進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，以得到足夠數(shù)量的符合要求的單核雜交瘤細(xì)胞。

（6）若將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，可從細(xì)胞培養(yǎng)液中提取出大量的單克隆抗體。

（7）應(yīng)用蛋白質(zhì)工程，可以改造鼠源性抗體分子的結(jié)構(gòu)，降低鼠源性抗體的人體反應(yīng)。

考點(diǎn)：本題考查基因工程、單克隆抗體及蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力。