Question

人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選．利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示．

（1）卵母細胞除從活體輸卵管中采集外，還可以從已處死的雌鼠

 

（器官）中獲�。�
（2）圖中的高血壓相關基因作為

 

，質(zhì)粒作為

 

，二者需用

 

切割后連接成重組載體，該過程與質(zhì)粒上含有

 

有關．
（3）通常采用

 

方法將高血壓相關基因?qū)�入到小鼠的受精卵中�?br />（4）子代大鼠如果

 

和

 

，即可分別在分子水平和個體水平上說明高血壓相關基因已成功表達，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動物模型．
（5）細菌質(zhì)粒能與高血壓相關基因片段拼接的原因是

 

（6）請補充完整制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的四個步驟：

 

→

 

→

 

→

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：圖示是利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程圖．圖中包括體外受精過程、采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因（基因B）導入受精卵的過程、早期胚胎發(fā)育過程以及胚胎移植過程．

解答： 解：（1）對于實驗動物大鼠，如果是從活體輸卵管中采集的卵母細胞，可以直接與獲能的精子在體外受精．如果是從已處死的雌鼠卵巢中采集的卵母細胞，需要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精．
（2）題圖中的高血壓相關基因作為目的基因，質(zhì)粒作為載體，二者需用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割后才能連接成重組載體，該過程與質(zhì)粒上有限制酶切割位點有關．
（3）將目的基因?qū)�入動物細胞常用顯微注射法．
（4）若在子代大鼠的體內(nèi)檢測出與高血壓相關的蛋白質(zhì)，則從分子水平上說明高血壓相關基因已成功表達；若子代大鼠的血壓升高，則從個體水平上說明高血壓相關基因已成功表達．
（5）細菌質(zhì)粒能與高血壓相關基因能夠拼接的原因是它們具有共同的物質(zhì)基礎和結(jié)構(gòu)基礎，以及只有相同個的黏性末端．
（6）制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的四個步驟：目的基因的獲�。ǜ哐獕合嚓P基因）、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細胞（受精卵）、目的基因的檢測與表達．
故答案為：
（1）卵巢
（2）目的基因　運載體 同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）　限制酶切割位點
（3）顯微注射法
（4）檢測到體內(nèi)有相關蛋白　    出現(xiàn)高血壓
（5）它們具有共同的物質(zhì)基礎和結(jié)構(gòu)基礎，以及只有相同個的黏性末端
（6）目的基因的獲取   基因表達載體的構(gòu)建   將目的基因?qū)�入受體細胞   目的基因的檢測與表達

點評：本題結(jié)合利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程圖，考查基因工程的原理及技術(shù)、胚胎工程等知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記卵母細胞的采集和培養(yǎng)的方法，能準確判斷圖中各結(jié)構(gòu)或過程的名稱．