Question

14．回答下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的問(wèn)題．
（1）PCR的反應(yīng)過(guò)程包括變性、復(fù)性和延伸三步．整個(gè)PCR反應(yīng)過(guò)程中需要適宜的溫度和酸堿度，前者由PCR儀自動(dòng)控制，后者需靠緩沖液來(lái)維持．
（2）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源和碳源．除此之外，培養(yǎng)基還必須含有基本成分是水和無(wú)機(jī)鹽．對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是高壓蒸汽滅菌．
（3）某同學(xué)嘗試微生物接種的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖所示．該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是涂布不均勻．

Answer 1

分析 1、PCR技術(shù)：
（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
（2）原理：DNA復(fù)制．
（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物．
（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
（5）過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．
2、稀釋涂布法：是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)．在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落．

解答 解：（1）PCR的反應(yīng)過(guò)程包括變性、復(fù)性和延伸三步．整個(gè)PCR反應(yīng)過(guò)程中需要適宜的溫度和酸堿度，前者由PCR儀自動(dòng)控制，后者需靠緩沖液來(lái)維持．
（2）培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分一般包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源，如培養(yǎng)基中的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源和碳源．對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用高壓蒸汽滅菌法．
（3）由圖可知，該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；圖中菌落分布不均勻，由此推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是涂布不均勻．
故答案為：
（1）變性、復(fù)性和延伸     緩沖液
（2）氮源    碳源    水     無(wú)機(jī)鹽     高壓蒸汽滅菌
（3）稀釋涂布平板法    涂布不均勻

點(diǎn)評(píng) 本圖結(jié)合圖解，考查PCR技術(shù)、微生物的分離和培養(yǎng)等知識(shí)，要求考生識(shí)記PCR技術(shù)的原理、條件及過(guò)程等基礎(chǔ)知識(shí)；識(shí)記培養(yǎng)基的成分及接種微生物的方法，能根據(jù)圖中信息準(zhǔn)確答題．