Question

5．常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進(jìn)行酒精發(fā)酵，自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精，科學(xué)家欲從果園的葡萄上或土壤中分離這種酵母菌，操作如下：
（1）將自然界中采集的葡萄帶回實驗室，用無菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中，然后將瓶中的液體用涂布接種于以木糖為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，獲得能利用木糖的多個酵母菌菌落．
（2）若要檢測土樣中的酵母含量，應(yīng)采用稀釋涂布平板法法、在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．然后，將1mL土壤溶液稀釋分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度各在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，6個平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58、2、7和5，據(jù)此可得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)位5.8×10⁶個．
（3）若要長期保存酵母菌，菌液中常需要加入一定量的甘油（填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”），且要放置在-20℃的冷凍箱中．若要短期保存酵母菌，可將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，菌落長成后，將試管放置在4℃的冰箱中保藏．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的．利用選擇培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)基因技術(shù)能夠篩選利用葡萄糖和木糖產(chǎn)生酒精，且對酒精的耐受能力強的酵母菌．
2、菌種的保存：

	臨時保存法	甘油管藏法
適用對象	頻繁使用的菌種	長期保存的菌種
培養(yǎng)及類型	固體斜面培養(yǎng)基	液體培養(yǎng)基
溫度	4℃	-20℃
方法	菌落長成后于冰箱中保存，每3～6個月將菌種從舊的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上	將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的甘油混合均勻后于冷凍箱內(nèi)保存
缺點	菌種易被污染或產(chǎn)生變異	\\

解答 解：（1）根據(jù)題意可知，“自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精，科學(xué)家欲從果園的葡萄上或土壤中分離這種酵母菌”，因此篩選這種酵母菌需要以木糖為唯一碳源，在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，獲得能利用木糖的多個酵母菌菌落．
（2）若要檢測土樣中的酵母菌含量，應(yīng)采用稀釋涂布平板法．在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基先行培養(yǎng)了一段時間，用于檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．稀釋涂布平板法中，一般選用30～300個菌落數(shù)進(jìn)行計數(shù)，因此采用稀釋10倍和菌落數(shù)分別為59、57、58的進(jìn)行計算，據(jù)此可得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)為=（59+57+58）÷3×10÷（0.1×10^-3）=5.8×10⁶個．
（3）若要長期保存酵母菌，菌液中常需要加入一定量的甘油，且要放置在-20℃的冷凍箱中．若要短期保存酵母菌，可將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，菌落長成后，將試管放置在4℃的冰箱中保藏．
故答案為：
（1）碳源    菌落
（2）稀釋涂布平板法     檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格     5.8×10⁶
（3）甘油-20     4

點評 本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生掌握微生物選擇的方法以及培養(yǎng)基的制備，掌握菌種保存的方法等，屬于考綱中識記、理解層次的考查．