Question

9．下列說法中不正確的是（　　）

• A． 科學(xué)家從70℃～80℃熱泉中分離得到耐高溫的TaqDNA聚合酶
• B． 分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度
• C． 采集的土樣需經(jīng)高溫滅菌后，才可以用于制取土壤稀釋液
• D． 同其他環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多

Answer 1

分析 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)：
1．分離菌株的思路
（1）自然界中目的菌株的篩選
①依據(jù)：根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找．
②實(shí)例：PCR技術(shù)過程中用到的耐高溫的Taq DNA聚合酶，就是從熱泉中篩選出來的Taq細(xì)菌中提取出來的．
（2）實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選
①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度．pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長．
培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源．缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的細(xì)菌才能分解尿素．配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，能夠生長的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌．
2．統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法
（1）稀釋涂布平板法（間接）
①當(dāng)樣品的稀釋庋足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌．
②通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測(cè)樣品中大約含有的活菌數(shù)．
（2）利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)
3．分解尿素的細(xì)菌的鑒定細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，可確定該種細(xì)菌能夠分解尿素．
4．實(shí)驗(yàn)流程
土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上→挑選能生長的菌落→鑒定．

解答 解：A、科學(xué)家從70℃～80℃熱泉中分離得到耐高溫的TaqDNA聚合酶，A正確；
B、分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度，B正確；
C、采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，其中的微生物全部被殺死，不能得到所需的微生物，C錯(cuò)誤；
D、同其他環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多，D正確．
故選：C．

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物的兩種方法，掌握從土壤中分離微生物的方法及操作，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．