Question

【題目】為增加油葵種子中的含油量，科學家嘗試將花生中的酶A基因?qū)�入油葵細胞，獲得轉(zhuǎn)基因油葵新品種。

（1）為獲取目的基因，可從花生細胞中提取______________，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成____________。以此為模板通過_____________擴增目的基因。

（2）構(gòu)建重組DNA分子需用載體，常見的載體有____________；構(gòu)建好的載體一般都包括以下幾個部分：啟動子、目的基因和__________________

（3）剪取油葵的葉片放入浸染液中，一段時間后篩選獲得轉(zhuǎn)基因油菜細胞。最后經(jīng)過___________培育成轉(zhuǎn)基因油葵植株，此種技術(shù)的原理是___________________。

（4）研究發(fā)現(xiàn)，如果將該酶A的20位和24位氨基酸變?yōu)榘腚装彼崞浯呋�能力將提�?/span>2倍。通過蛋白質(zhì)工程對酶A進行改造，所需步驟有：蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析→_______→________→將改造后的酶A基因?qū)�人受體細胞→獲得所需的蛋白質(zhì)。

（5）經(jīng)過種植轉(zhuǎn)基因油葵發(fā)現(xiàn)，雖然轉(zhuǎn)基因油葵種子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丟失，其原因是_______。

Answer 1

【答案】mRNA cDNA PCR技術(shù) 質(zhì)粒、動植物病毒、λ噬菌體的衍生物等 終止子和標記基因 植物組織培養(yǎng)技術(shù) 植物細胞的全能性 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計 酶A基因的定向改造 抗灰霉菌基因沒有表達（或丟失等）

【解析】

基因工程基本操作順序：目的基因獲取（從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增、人工合成），表達載體的構(gòu)建（啟動子+目的基因+標記基因+終止子），將目的基因?qū)�入受體細胞（植物細胞用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法，動物細胞用顯微注射法，微生物細胞用感受態(tài)細胞法），目的基因的檢測與鑒定（導入檢測用DNA分子雜交技術(shù)，轉(zhuǎn)錄檢測用分子雜交技術(shù)，翻譯檢測用抗原——抗體雜交法）。蛋白質(zhì)工程過程：預(yù)測蛋白質(zhì)的功能→設(shè)計預(yù)期蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成DNA→表達出蛋白質(zhì)。

（1）逆轉(zhuǎn)錄需要從花生細胞中提取mRNA為模板，以脫氧核苷酸為原料合成cDNA；通過PCR技術(shù)擴增目的基因。

（2）構(gòu)建重組DNA分子需用載體，常見的載體有質(zhì)粒、動植物病毒、λ噬菌體的衍生物等；構(gòu)建好的載體一般都包括啟動子、目的基因、標記基因和終止子。

（3）得到轉(zhuǎn)基因油菜細胞后，要培育成轉(zhuǎn)基因油葵植株，需要用植物組織培養(yǎng)技術(shù)才能實現(xiàn)，該技術(shù)的原理是植物細胞的全能性。

（4）通過蛋白質(zhì)工程對酶A進行改造的步驟為：蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析→蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計→酶A基因的定向改造→將改造后的酶A基因?qū)�人受體細胞→獲得所需的蛋白質(zhì)。

（5）抗灰霉菌的能力丟失的原因是抗灰霉菌基因沒有表達（或丟失）。