Question

3．某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下．將各種物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL，再經(jīng)高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用．

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4 g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？不能（填“能”或“不能”），原因是培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物（培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素）．
（2）培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌方法滅菌，培養(yǎng)皿用干熱滅菌方法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到50℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，以免造成污染．
（3）要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用（稀釋）涂布平板法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)目就能大約推測(cè)出樣品中活菌數(shù)．
（4）培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染．對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生．
（5）實(shí)驗(yàn)中使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止微生物的擴(kuò)散．

Answer 1

分析 篩選纖維素分解菌需要以纖維素為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基．分離纖維素分解菌計(jì)數(shù)時(shí)需要用稀釋涂布平板法接種．

解答 解：（1）據(jù)表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，所以不能分離尿素分解菌，篩選纖維素分解菌需要以纖維素為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基．
（2）微生物培養(yǎng)中的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，玻璃器皿可以使用干熱滅菌．倒平板時(shí)需要培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)在酒精燈火焰旁進(jìn)行，等平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染．
（3）固體培養(yǎng)基上的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法適用于微生物的統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)目/平均菌落數(shù)能夠推測(cè)樣品中的活菌數(shù)．
（4）檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染，需要將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，如果有菌落數(shù)目被污染，否則沒(méi)有被污染．
（5）為防止微生物污染環(huán)境和操作者，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌后倒掉．
故答案為：
（1）不能　 培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物（培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素）
（2）高壓蒸汽滅菌  干熱滅菌  50  酒精燈火焰  培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基
（3）（稀釋）涂布平板　 菌落數(shù)目
（4）將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生
（5）滅菌

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查尿素分解菌的篩選即培養(yǎng)，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)選擇培養(yǎng)基和無(wú)菌操作的理解運(yùn)用．