Question

5．病毒病是馬鈴薯的主要病害，培育抗病毒的馬鈴薯植株可以采用基因工程技術(shù)，研究表明將感染馬鈴薯的病毒的蛋白質(zhì)外殼基因?qū)�入馬鈴薯體內(nèi)可以獲得抗病毒的植株，該病毒的遺傳物質(zhì)是DNA，回答下列問題．
（1）獲取病毒的蛋白質(zhì)外殼基因可以用限制酶處理病毒的DNA，擴(kuò)增病毒的蛋白質(zhì)外殼基因可以用PCR技術(shù)．
（2）將病毒的蛋白質(zhì)外殼基因?qū)�入馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)一般采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這種方法是先將目的基因插入到（農(nóng)桿菌）Ti質(zhì)粒的T-DNA上，將病毒的蛋白質(zhì)外殼進(jìn)導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞還可以采用基因槍法和花粉管通道法．
（3）檢測受體細(xì)胞DNA 分子上是否插入了目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否翻譯形成蛋白質(zhì)采用抗原-抗體雜交技術(shù)；在個(gè)體生物學(xué)水平鑒定馬鈴薯植株是否具有抗病毒特性的方法是將相應(yīng)的馬鈴薯病毒接種到馬鈴薯植株上．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲取病毒的蛋白質(zhì)外殼基因可以用限制酶處理病毒的DNA，擴(kuò)增病毒的蛋白質(zhì)外殼基因可以用PCR技術(shù)．
（2）將病毒的蛋白質(zhì)外殼基因?qū)�入馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)一般采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這種方法是先將目的基因插入到 （農(nóng)桿菌）Ti質(zhì)粒的T-DNA上，將病毒的蛋白質(zhì)外殼進(jìn)導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞還可以采用基因槍法和花粉管通道法．
（3）檢測受體細(xì)胞DNA 分子上是否插入了目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否翻譯形成蛋白質(zhì)采用抗原-抗體雜交技術(shù)；在個(gè)體生物學(xué)水平鑒定馬鈴薯植株是否具有抗病毒特性的方法是將相應(yīng)的馬鈴薯病毒接種到馬鈴薯植株上．
故答案為：
（1）限制      PCR
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化   （農(nóng)桿菌）Ti質(zhì)粒的T-DNA     基因槍法和花粉管通道
（3）DNA分子雜交技術(shù)    抗原-抗體雜交技術(shù)     將相應(yīng)的馬鈴薯病毒接種到馬鈴薯植株上

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記層次的考查．