Question

9．酵母菌的蛋白質、維生素含量高，可用于釀造啤酒和生產食品、藥品等．科學家將大麥細胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，獲得的啤酒酵母菌種可產生LTP1蛋白，并釀出泡沫豐富的啤酒．看懂如圖的操作過程示意圖，回答問題：

（1）圖中獲得C需要用到的酶有限制酶和DNA連接酶，篩選含重組質粒的酵母菌需要在含有青霉素的培養(yǎng)基上進行．
（2）該技術定向改變了酵母菌的性狀，這在可遺傳變異來源中屬于基因重組（類型）．
（3）除了從大麥細胞中可直接分離獲得LTP1基因外，還可以采用人工合成方法獲得目的基因．本操作中為了將LTP1基因導入酵母菌細胞內，所用的運載體通常是質粒．
（4）作為基因工程的運載體，應具備的基本條件有能自我復制、具有標記基因（答出兩點即可）．而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子．
（5）此操作中可以用分別含有青霉素、四環(huán)素的兩種選擇培養(yǎng)基進行篩選，則有C進入的酵母菌在兩種選擇培養(yǎng)基上的生長情況在含有青霉素的培養(yǎng)基上能存活，但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活．
（6）除了看啤酒泡沫豐富與否外，還可以怎樣檢測LTP1基因在啤酒酵母菌中的表達？檢驗轉基因啤酒酵母菌能否產生LTPl蛋白．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示將使啤酒產生豐富泡沫的LTP_l基因植入啤酒酵母菌中，使其產生LTP_l蛋白，釀出泡沫豐富的啤酒的過程．圖中A為獲取目的基因的過程；B為質粒；C為基因表達載體．

解答 解：（1）圖中C為基因表達載體，獲得基因表達需要限制酶和DNA連接酶．由圖可知，標記基因是青霉素抗性基因，因此篩選含重組質粒的酵母菌需要在含有青霉素的培養(yǎng)基上進行．
（2）圖示采用了轉基因技術，其原理是基因重組．
（3）從大麥細胞中可直接分離獲得LTP1基因，還可采用人工合成方法獲得目的基因．由圖可知，本操作中將LTP1基因導入酵母菌細胞內所用的運載體是質粒．
（4）作為基因工程的運載體，應具備的基本條件有能自我復制、具有標記基因、具有多個限制酶切割位點．而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子．
（5）在構建基因表達載體時，破壞了四環(huán)素抗性基因，但沒有破壞青霉素抗性基因．因此，此操作中可以用分別含有青霉素、四環(huán)素的兩種選擇培養(yǎng)基進行篩選，則有C進入的酵母菌在含有青霉素的培養(yǎng)基上能存活，但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活．
（6）除了看啤酒泡沫豐富與否外，還可以通過檢驗轉基因啤酒酵母菌能否產生LTPl蛋白來檢測LTP1基因在啤酒酵母菌中的表達情況．
故答案為：
（1）限制酶  DNA連接酶  青霉素  
（2）基因重組    
（3）人工合成     質粒
（4）能自我復制、具有標記基因  啟動子和終止子
（5）在含有青霉素的培養(yǎng)基上能存活，但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活
（6）檢驗轉基因啤酒酵母菌能否產生LTPl蛋白

點評 本題結合轉基因啤酒酵母的培育過程圖，考查基因工程的原理及技術，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程及各物質的名稱，屬于中檔題．