Question

18．炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染�。�炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀．對(duì)炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確診．
細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落．
細(xì)菌鑒定：實(shí)驗(yàn)流程如圖所示

（1）實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為有機(jī)碳（填“無(wú)機(jī)碳”或“有機(jī)碳”）．
（2）挑選可疑菌落制片后，用顯微鏡觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌．
（3）接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24小時(shí)，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是細(xì)菌大量繁殖，對(duì)照組試管中應(yīng)加入等量生理鹽水，與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低（填“高”或“低”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．
（4）某間學(xué)嘗試將菌接到固體培養(yǎng)基上，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示．該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法．推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是涂布不均勻．
（5）某廠的發(fā)酵液因被噬菌體污染，菌群死亡殆盡．而人們從中獲得了少數(shù)可抵抗噬菌體的新菌種．細(xì)菌這種變異的產(chǎn)生來(lái)自于基因突變．

Answer 1

分析 1、微生物常見(jiàn)的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法：
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇�，此外，在接種過(guò)程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過(guò)火焰燃燒來(lái)滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：培養(yǎng)基一般采用該方法進(jìn)行滅菌．

解答 解：（1）炭疽桿菌屬于異養(yǎng)型生物，因此實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為有機(jī)碳．
（2）挑選可疑菌落制片后，用顯微鏡觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌．
（3）接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24小時(shí)，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是細(xì)菌大量繁殖；對(duì)照組試管中應(yīng)加入等量生理鹽水，與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，實(shí)驗(yàn)組中加入噬菌體液，由于噬菌體侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌數(shù)量下降，如果實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．
（4）圖乙所示采用的是稀釋涂片平板法；圖中菌落集中某一區(qū)域，出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因是涂布不均勻．
（5）細(xì)菌屬于原核生物，其可遺傳的變異來(lái)源只有基因突變．
故答案為：
（1）有機(jī)碳
（2）顯微鏡
（3）細(xì)菌大量繁殖　等量生理鹽水　低
（4）稀釋涂布平板法    涂布不均勻
（5）基因突變

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生掌握微生物分離和純化的兩種方法，掌握無(wú)菌技術(shù)的主要內(nèi)容，能夠運(yùn)用噬菌體專一性的侵染細(xì)菌的知識(shí)儲(chǔ)備解決疑似患者是否被炭疽桿菌感染．