Question

【題目】農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤。為修復(fù)被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細(xì)菌。已知該除草劑(含氮有機(jī)物)在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明。請分析回答：

(1)微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作技術(shù)，該技術(shù)的核心是_______。

(2) 在選育過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一______的培養(yǎng)基上。通過比較單菌落周圍__________的大小，可篩選出高效的目的菌。實驗結(jié)果如右圖顯示的A～E五種菌株中，_______是最理想菌株。

(3) 若想對初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計數(shù)，可采用的接種方法是_______。將lmL土壤溶液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度各在3個平板上分別接入0.lmL稀釋液，經(jīng)過適當(dāng)培養(yǎng)后，6個平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58和2、7、5，空白對照組的平板上沒有菌落，則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為_____________個。實際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計所得的這一數(shù)值要大，因為______________________。

Answer 1

【答案】無菌操作 氮源 透明圈 E 稀釋涂布平板法 5.8106 當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

【解析】

1、選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物生長。分析題意可知，“該除草劑（含氮有機(jī)物）在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明”，說明培養(yǎng)基中是以除草劑為唯一氮源，并且降解后培養(yǎng)基出現(xiàn)透明圈。

2、每ml樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀釋度下的平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)M代表稀釋的倍數(shù)。

（1）微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作技術(shù)，該技術(shù)的核心是防止雜菌污染（無菌操作）。

（2）該除草劑為含氮有機(jī)物，為了選育能降解該除草劑的細(xì)菌，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上。通過比較單菌落周圍透明圈的大小，可篩選出高效的目的菌。E透明圈最大，降解除草劑的效果最好，故是最理想菌株。

（3）若想對初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計數(shù)，可采用稀釋涂布平板法。微生物計數(shù)時需要選擇菌落數(shù)在30300的進(jìn)行記數(shù)，因此每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為＝(59+57+58)÷3÷0.1×10×103＝5.8×106個。統(tǒng)計結(jié)果是用菌落數(shù)來表示的，當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此實際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計所得的這一數(shù)值要大。