Question

【題目】[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]下圖表示利用羊生產(chǎn)抗凝血酶的過(guò)程，圖中ampR表示氨芐青霉素抗性基因，tetR表示四環(huán)素抗性基因，BamH I、Hind Ⅲ、Sma I為三種限制酶及酶切位點(diǎn)，據(jù)圖回答問(wèn)題：

（1）通常采用_______技術(shù)來(lái)擴(kuò)增獲得抗凝血酶基因，其原理是_________，需要_______酶。據(jù)圖分析，可將目的基因插入________抗性基因中。

（2）質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是______，除質(zhì)粒外，還有______（至少寫出兩種）也可以充當(dāng)載體。

（3）過(guò)程①可采用______的方法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入羊受精卵中，可采用_____技術(shù)來(lái)檢測(cè)抗凝血酶基因是否轉(zhuǎn)錄成功。

Answer 1

【答案】 PCR DNA雙鏈復(fù)制 熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq） 四環(huán)素（tetR） DNA（小型環(huán)狀DNA） 噬菌體的衍生物、動(dòng)物或植物病毒（答上述兩個(gè)即可給分） 顯微注射 分子雜交

【解析】分析圖解：圖中目的基因抗凝血酶基因左側(cè)用BamHⅠ切割，右側(cè)用HindⅢ切割或者SamⅠ酶切割；在質(zhì)粒上只有BamHⅠ和HindⅢ兩種酶的切割位點(diǎn)，所以切割目的基因只能選BamHⅠ和HindⅢ切割，且正好插入質(zhì)粒的tetR基因中。

（1）要獲得大量目的基因，通常采用PCR擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增，該技術(shù)是利用DNA雙鏈復(fù)制的原理，在熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）酶的催化下，以特定引物和四種脫氧核苷酸為原料，合成大量目的基因。據(jù)圖，僅將抗凝血酶基因切割下來(lái)，需要在抗凝血酶基因的左側(cè)用BamHⅠ切割，右側(cè)用HindⅢ切割。當(dāng)抗凝血酶基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒后，tetR基因被抗凝血酶基因隔開，即抗凝血酶基因插入到了tetR基因中。

（2）質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是小型環(huán)狀DNA 。除質(zhì)粒外，還有噬菌體的衍生物、動(dòng)物或植物病毒可以作為運(yùn)載體。

（3）目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞——受精卵，方法一般是顯微注射法。檢測(cè)抗凝血酶基因是否轉(zhuǎn)錄成功一般采用基因探針進(jìn)行分子雜交的方法。