Question

（16分）草甘膦是一種廣譜除草劑，其除草機(jī)制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成，最終導(dǎo)致植物死亡。但是，它的使用有時也會影響到植物的正常生長。目前，已發(fā)現(xiàn)可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因，若將該基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞內(nèi)，從而獲得的轉(zhuǎn)基因植物就能耐受高濃度的草甘膦。

取6株植物，其中，植物A和D對草甘膦敏感，B和E對草甘膦天然具有抗性，C和F則經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，但是是否成功還未知。圖1為4種限制酶的識別序列和酶切位點，圖2為含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切點。據(jù)圖回答下列問題：

（1）若A-C澆清水，D-F澆的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成長的是________。

（2）若要從大腸桿菌中篩選出含EPSPS基因的突變菌株甲，在大腸桿菌培養(yǎng)基中還必須加入____________。

（3）一個完整的基因表達(dá)載體除了具備復(fù)制原點、啟動子和終止子外，還應(yīng)包括______和________。

（4）若需利用酶切法獲得目的基因，最應(yīng)選擇的限制酶是________和________。

（5）通常用____________法將EPSPS基因?qū)�入植物體內(nèi)。假設(shè)EPSPS基因已被成功轉(zhuǎn)移到植物F中，但植物F仍沒有表現(xiàn)出抗性，分析可能的原因____________。

 

Answer 1

（1）ABCE (2)草甘膦 （3）標(biāo)記基因 目的基因 （4） MspⅠ SmaⅠ

（5）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 目的基因沒有成功表達(dá)或表達(dá)的產(chǎn)物失活

【解析】

試題分析：

（1）題干中植物A和D對草甘膦敏感，B和E對草甘膦天然具有抗性，C和F則經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，是否成功還未知，所以A-C澆清水，都能健康成長。D-F澆的水中含有草甘膦，D肯定不能健康成長，E肯定能健康成長，F(xiàn)未知。因此肯定能健康成長的是ABCE。

（2）要從大腸桿菌中篩選出含EPSPS基因的突變菌株，則必須要用含草甘膦的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌。

（3）一個完整的基因表達(dá)載體由復(fù)制原點、啟動子、終止子、標(biāo)記基因 、目的基因組成。

（4）對照圖1和2所示，酶BamHⅠ、MboⅠ能破壞EPSPS基因，不能使用，應(yīng)用MspⅠ與SmaⅠ同時進(jìn)行酶切。

（5）將EPSPS基因?qū)�入植物體內(nèi)通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。如果EPSPS基因已被成功轉(zhuǎn)移到植物F中，但目的基因沒有成功表達(dá)或表達(dá)的產(chǎn)物失活，植物F仍沒有表現(xiàn)出抗性。

考點：本題考查基因工程的知識。意在考查能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，能用文字、圖表以及數(shù)學(xué)方式等多種表達(dá)形式準(zhǔn)確地描述生物學(xué)方面的內(nèi)容。能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。