Question

8．下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是（　�。�

• A． 確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進(jìn)行計數(shù)
• B． 取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1ml，分別涂布于各組平板上
• C． 將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24-48小時
• D． 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板

Answer 1

分析 統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法
（1）顯微鏡直接計數(shù)法
 ①原理：利用特定細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計數(shù)板計數(shù)； ③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌．
（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）
 ①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌．通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌．
②操作
a、設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準(zhǔn)確性．
b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)．
③計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)．

解答 解：A、確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30-300的實驗組平板進(jìn)行計數(shù)，A錯誤；
B、取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1ml，分別涂布于各組平板上，B正確；
C、將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24-48小時，C正確；
D、平板培養(yǎng)基的制備步驟為：計算、稱量、融化、滅菌、倒平板．因此，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，D正確．
故選：A．

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，重點考查微生物計數(shù)的相關(guān)知識，要求考生識記培養(yǎng)基的制備過程；識記計數(shù)微生物常用的兩種方法，尤其是稀釋涂布平板法，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．