Question

8．以下是花藥培養(yǎng)和細(xì)菌培養(yǎng)的基本過程．請回答下列問題：

（1）選材時，確定花藥中花粉的發(fā)育時期最常用的染色方法是醋酸洋紅法；細(xì)菌培養(yǎng)中常用的接種方法是平板劃線法活稀釋涂布平板法．
（2）材料消毒時，用酒精和氫化汞溶液對花蕾處理后均需用無菌水沖洗，目的是終止消毒液對細(xì)胞的傷害；對培養(yǎng)基滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌；在接種過程中，對接種環(huán)和鑷子等金屬器具進(jìn)行滅菌的方法是灼燒滅菌．
（3）在花藥培養(yǎng)過程中，花粉可經(jīng)過愈傷組織產(chǎn)生叢芽生根后發(fā)育成植株，還可經(jīng)過胚胎體途徑發(fā)育成植株；花藥各階段的培養(yǎng)基組分差異通常比細(xì)菌各代培養(yǎng)基的組分差異大（填“大”或“小”）．
（4）花藥培養(yǎng)的目的是獲得花粉植株，用于單倍體育種；細(xì)菌培養(yǎng)過程中，使用選擇培養(yǎng)基的目的是篩選菌種．

Answer 1

分析 花藥離體培養(yǎng)形成的是單倍體植株，對植物來說，適宜花粉培養(yǎng)的時期是花粉應(yīng)處于單核期，因為單核期，細(xì)胞核由中央移向一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高．選擇花藥時，確定花藥發(fā)育時期最常用的方法是醋酸洋紅法．某些植物的花粉不易著色需采用焙花青-鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色．花蕾用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡30s→無菌水沖洗→吸干表面的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中2～4min→無菌水再沖洗3～5次．在無菌條件下剝離花藥時要盡量不損傷花藥（否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織），同時還要徹底除去花絲．因為花絲的存在不利于愈傷組織或胚狀體的形成．實驗流程為：材料的選取→材料的消毒→接種和培養(yǎng)→結(jié)果分析與評價．

解答 解：（1）單核期，細(xì)胞核由中央移向一側(cè)時期的花粉對離體刺激敏感，可提高成功率．一般要通過鏡檢來確定花粉是否處于合適的發(fā)育期，這時需要對花粉的細(xì)胞核用醋酸洋紅進(jìn)行染色．篩選和分離微生物常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法．
（2）材料消毒時，為了終止消毒液對細(xì)胞的傷害，用酒精和氫化汞溶液對花蕾處理后均需用無菌水沖洗；培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌方法進(jìn)行滅菌．對接種環(huán)和鑷子等金屬器具用灼燒滅菌進(jìn)行滅菌．
（3）花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩條途徑：一是花粉通過胚狀體階段發(fā)育成植株；二是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再將其誘導(dǎo)分化成植株．
花藥培養(yǎng)的各個階段，培養(yǎng)基配方不完全一樣，先是誘導(dǎo)愈傷組織的形成的，然后誘導(dǎo)生芽、誘導(dǎo)生根．通常比細(xì)菌各代培養(yǎng)基的組分差異大．．
（4）花藥離體培養(yǎng)，可以獲得單倍體植株．細(xì)菌培養(yǎng)過程中，選擇培養(yǎng)的目的是以確保能夠從樣品中分離到所需的微生物，
故答案為：
（1）醋酸洋紅法   平板劃線法活稀釋涂布平板法
（2）終止消毒液對細(xì)胞的傷害   高壓蒸汽滅菌  灼燒滅菌
（3）胚胎體    大
（4）單倍體育種     篩選菌種

點評 本題考查了花藥離體培養(yǎng)材料的選擇、培養(yǎng)基中激素的作用等相關(guān)知識，意在考查考生對于植物組織培養(yǎng)的理解、識記和運用能力，難度中等．