Question

生長(zhǎng)激素在治療激素分泌過(guò)少的矮小癥方面有積極的作用．為了批量生產(chǎn)生長(zhǎng)激素，可以采取轉(zhuǎn)基因技術(shù)將控制生長(zhǎng)激素合成的基因轉(zhuǎn)移到微生物細(xì)胞內(nèi)．圖1是涉及此轉(zhuǎn)基因技術(shù)的幾種限制酶識(shí)別序列及其割位點(diǎn)；
下面圖2、圖3中箭頭表示相關(guān)限制酶對(duì)質(zhì)粒和供體DNA的切割位點(diǎn)：

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）四種酶切位點(diǎn)相比較，SmaI酶切位點(diǎn)結(jié)構(gòu)最穩(wěn)定，原因是

 

．
（2）用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用限制酶

 

切割，原因是

 

．
（3）為了檢測(cè)基因轉(zhuǎn)入的成功，需要在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入

 

，若微生物能正常生長(zhǎng)，說(shuō)明轉(zhuǎn)入成功．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專(zhuān)題：

分析：DNA分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是指DNA分子雙螺旋空間結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性．因?yàn)?span dealflag="1" class="MathJye" mathtag="math" style="whiteSpace:nowrap;wordSpacing:normal;wordWrap:normal">

C  .

G

有三對(duì)氫鍵，而

A  .

T

含有二對(duì)氫鍵，因此DNA分子中堿基對(duì)

C  .

G

越多，DNA結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定．基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心．需要同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，使它們露出相同的末端，才可以用DNA連接酶連接成基因表達(dá)載體．基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因．標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因．

解答： 解：（1）四種酶切位點(diǎn)相比較，SmaI酶切位點(diǎn)中含有的堿基對(duì)

C  .

G

最多，

C  .

G

有三對(duì)氫鍵，因此SmaI酶切位點(diǎn)結(jié)構(gòu)最穩(wěn)定．
（2）目的基因和質(zhì)粒的抗性基因中含有SmaI酶切位點(diǎn)，因此在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，不能使用限制酶SmaI．
（3）根據(jù)質(zhì)粒中抗性基因是抗生素抗性基因，因此基因轉(zhuǎn)入是否成功，可以在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入抗生素．若微生物能正常生長(zhǎng)，說(shuō)明轉(zhuǎn)入成功；否則，不成功．
故答案為：
（1）堿基C-G具有三對(duì)氫鍵
（2）SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因
（3）抗生素

點(diǎn)評(píng)：本題綜合考查了基因工程和DNA分子結(jié)構(gòu)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問(wèn)題的能力．